代謝調節(jié)育種方法(簡述微生物代謝的調節(jié)方式)
1.簡述微生物代謝的調節(jié)方式有哪些
微生物的代謝調節(jié)主要有兩種方式：酶合成的調節(jié)和酶活性的調節(jié).
酶合成的調節(jié)
【酶合成的調節(jié)】：微生物細胞內的酶可以分為組成酶和誘導酶兩類.組成酶時微生物細胞內一直存在的酶，它們的合成只受遺傳物質的控制，而誘導酶則時在環(huán)境中存在某種物質的情況下才能夠合成的酶.例如，在用葡萄糖和乳糖作碳源的培養(yǎng)基本上培養(yǎng)大腸桿菌，開始時，大腸桿菌只能利用葡萄糖而不能利用乳糖，只有當葡萄糖被消耗完畢以后，大腸桿菌才開始利用乳糖，只有當葡萄糖被消耗完畢以后，大腸桿菌才開始利用乳糖.
酶活性的調節(jié)
【酶活性的調節(jié)】：微生物還能夠通過改變已有酶的催化活性來調節(jié)代謝的速率.酶活性發(fā)生主要原因時，代謝過程中產(chǎn)生的物質與酶結合，致使酶的結構產(chǎn)生變化.這種調節(jié)現(xiàn)象在核苷酸、維生素的合成代謝中十分普遍.
總結
上述兩種調節(jié)方式時同時存在，并且密切配合、協(xié)調作用的.通過對代謝的調節(jié)，微生物細胞內一般不會累積大量的代謝產(chǎn)物.
2.簡述生物體內代謝調節(jié)的幾種主要方式
根據(jù)生物的進化程度不同，代謝調節(jié)大體上可分神經(jīng)、激素和酶三個水平，而最原始、也最基本的是酶水平的調節(jié)。神經(jīng)和激素水平的調節(jié)最終也通過酶起作用。
酶水平代謝調節(jié)主要有兩種類型：一種是通過激活或抑制酶的催化活性，另一種是通過控制酶合成或降解的量。有下列幾種重要方式：
1、別構調節(jié)
代謝途徑的速率和方向主要依賴調節(jié)酶的量和活性，必需的不可逆反應是控制部位。代謝途徑中第一個不可逆反應常是重要的控制因素，催化這些關鍵步驟的酶屬于別構酶。這類酶是復雜的寡聚蛋白質，含有好幾個亞基，它們除含催化部位外，還含有調節(jié)部位。一定的效應物與調節(jié)部位結合后可改變酶分子的構象，進而影響其催化活性。對酶的催化活性起激活作用的效應物稱作正效應物，起抑制作用的為負效應物。效應物可以是底物、產(chǎn)物、代謝途徑的終產(chǎn)物、核苷酸類化合物等。調節(jié)分解代謝的別構酶可被正效應物ADP或AMP激活而被負效應物ATP抑制。別構調節(jié)是最迅速的代謝調節(jié)方式，其中以終產(chǎn)物對代謝序列反應中早期步驟的抑制作用（反饋抑制）最為常見；如大腸桿菌中異亮氨酸抑制催化其合成代謝系列反應第一個步驟的酶。一條代謝途徑中的別構酶也可對其他代謝途徑的中間物或產(chǎn)物作出反應，不同酶系統(tǒng)的速度能用這種方式互相協(xié)調。
2、共價修飾
對酶分子的化學結構進行修飾也可影響酶的催化活性，其中最重要的是側鏈羥基的磷酸化。例如，在糖原降解代謝中很重要的糖原磷酸化酶有a、b兩種類型。a型有充分的催化活性，b型幾乎沒有催化活性。b型酶經(jīng)蛋白激酶的作用在酶分子中某一特定的絲氨酸羥基上引入一個磷酸基，就轉變?yōu)閍型。a型經(jīng)蛋白磷酸酶水解脫去磷基團又可恢復成低活性的b型。生物可通過蛋白激酶和磷酸酶的作用影響磷酸化酶的活性，進而調節(jié)糖原的降解，蛋白激酶的活化又要經(jīng)過幾個步驟。所以，這種調節(jié)方式有放大效應，十分敏感；很少的信號物質便可產(chǎn)生迅速而巨大的效應。如腎上腺素刺激糖原的降解。
3、酶量調節(jié)
調節(jié)酶的合成和分解也受到調控。主要方式是調控酶的合成量。這是激活或阻止酶基因表達的結果。如大腸桿菌通常以葡萄糖為碳源，在培養(yǎng)基中僅有乳糖而無葡萄糖時，乳糖可誘導大腸桿菌產(chǎn)生能分解乳糖為半乳糖和葡萄糖的β-半乳糖苷酶，從而使乳糖得以利用（見操縱子）。高等生物也有這種能力，如在饑餓狀態(tài)下糖異生途徑較活躍，此時該代謝途徑中丙酮酸羥化酶的合成量增加了10倍。
4、區(qū)域化
真核細胞含有膜包裹著的多種細胞器，使各種酶和酶系被隔離在細胞的不同區(qū)域。如糖酵解、戊糖磷酸途徑和脂肪酸合成的酶系存在于胞液中；而脂肪酸氧化、三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化等過程在線粒體中進行。像糖異生和尿素合成這些過程又依賴胞液和線粒體兩個區(qū)域中的反應相互影響。一些特定分子的命運依賴它們存在于胞液還是線粒體中；因此，它們穿過線粒體內膜的轉運常被調節(jié)。例如，輸入線粒體的脂肪酸比在胞液中酯化或輸出的脂肪酸降解得更迅速。
3.代謝控制育種原理
微生物代謝控制育種是指以生物化學和遺傳學為基礎，研究代謝產(chǎn)物的生物合成途徑和代謝調節(jié)的機制，選擇巧妙的技術路線，通過遺傳育種技術獲得解除或繞過了微生物正常代謝途徑的突變株，從而人為地使用有用產(chǎn)物選擇性地大量合成積累。代謝控制發(fā)酵的關鍵，取決于微生物代謝調控機制是否被解除，能否打破微生物正常的代謝調節(jié)，人為地控制微生物的代謝。代謝控制育種和發(fā)酵過程的代謝控制培養(yǎng)是實現(xiàn)這一目標的兩的手段，而代謝控制育種則為主要支柱技術。微生物代謝控制育種是集生物化學、微生物學、遺傳學、發(fā)酵工程、生理學、分子生物學、化學等學科交叉產(chǎn)生的一門工程技術，該技術的廣泛應用，導致了氨基酸、核苷酸以及某些次級代謝產(chǎn)物的高產(chǎn)微生物菌株大批的推向生產(chǎn)，大大促進了發(fā)酵工業(yè)的發(fā)展。
微生物代謝控制育種主要是通過控制酶的作用來實現(xiàn)的，因為任何代謝途徑都是一系列酶促反應構成的。微生物細胞的代謝調節(jié)主要有兩種類型，一類是酶活性調節(jié)，調節(jié)的是已有酶分子的活性，是在酶化學水平上發(fā)生的；另一類是酶合成的調節(jié)，調節(jié)的是酶分子的合成量，這是在遺傳學水平上發(fā)生的[。利用發(fā)酵過程的一些限制因素來促進或控制酶產(chǎn)生的速率及其活性，可以控制發(fā)酵過程中不同階段的反應處于平衡狀態(tài)，同時也可以使微生物對外界環(huán)境的變化作出相應的反應。在細胞內這兩種方式單獨或協(xié)調進行選育，獲得突變株，達到改變代謝通路、降低支路代謝終產(chǎn)物的產(chǎn)生或切斷支路代謝途徑及提高細胞膜的透性，使代謝流向目的產(chǎn)物積累方向進行。代謝控制育種的調節(jié)體系主要包括誘導、分解阻遏、分解抑制、反饋阻遏、反饋抑制、細胞膜透性調節(jié)等。
4.代謝控制育種原理
微生物代謝控制育種是指以生物化學和遺傳學為基礎，研究代謝產(chǎn)物的生物合成途徑和代謝調節(jié)的機制，選擇巧妙的技術路線，通過遺傳育種技術獲得解除或繞過了微生物正常代謝途徑的突變株，從而人為地使用有用產(chǎn)物選擇性地大量合成積累。
代謝控制發(fā)酵的關鍵，取決于微生物代謝調控機制是否被解除，能否打破微生物正常的代謝調節(jié)，人為地控制微生物的代謝。代謝控制育種和發(fā)酵過程的代謝控制培養(yǎng)是實現(xiàn)這一目標的兩的手段，而代謝控制育種則為主要支柱技術。
微生物代謝控制育種是集生物化學、微生物學、遺傳學、發(fā)酵工程、生理學、分子生物學、化學等學科交叉產(chǎn)生的一門工程技術，該技術的廣泛應用，導致了氨基酸、核苷酸以及某些次級代謝產(chǎn)物的高產(chǎn)微生物菌株大批的推向生產(chǎn)，大大促進了發(fā)酵工業(yè)的發(fā)展。微生物代謝控制育種主要是通過控制酶的作用來實現(xiàn)的，因為任何代謝途徑都是一系列酶促反應構成的。
微生物細胞的代謝調節(jié)主要有兩種類型，一類是酶活性調節(jié)，調節(jié)的是已有酶分子的活性，是在酶化學水平上發(fā)生的；另一類是酶合成的調節(jié)，調節(jié)的是酶分子的合成量，這是在遺傳學水平上發(fā)生的[。利用發(fā)酵過程的一些限制因素來促進或控制酶產(chǎn)生的速率及其活性，可以控制發(fā)酵過程中不同階段的反應處于平衡狀態(tài)，同時也可以使微生物對外界環(huán)境的變化作出相應的反應。
在細胞內這兩種方式單獨或協(xié)調進行選育，獲得突變株，達到改變代謝通路、降低支路代謝終產(chǎn)物的產(chǎn)生或切斷支路代謝途徑及提高細胞膜的透性，使代謝流向目的產(chǎn)物積累方向進行。代謝控制育種的調節(jié)體系主要包括誘導、分解阻遏、分解抑制、反饋阻遏、反饋抑制、細胞膜透性調節(jié)等。
5.機體細胞水平的物質代謝調節(jié)有哪些主要方式
代謝調節(jié)方式
機體存在三級水平的代謝調節(jié)，包括細胞水平調節(jié)、激素水平調節(jié)和以中樞神經(jīng)系統(tǒng)為主導的整體水平調節(jié)。
（一）細胞水平調節(jié)主要通過調節(jié)關鍵酶的活性實現(xiàn)，其中通過改變現(xiàn)有酶分子的結構調節(jié)酶活性的方式，發(fā)生較快。也可通過改變酶的含量影響酶活性，此調節(jié)緩慢而持久。對酶結構調節(jié)包括酶的變構調節(jié)及酶蛋白的化學修飾調。對物質代謝和某些關鍵酶，兩種調節(jié)各有作用，相輔相成。
（二）激素水平調節(jié)中，激素與靶細胞受體特異結合，將代謝信號轉化為細胞內一系列信號轉導級聯(lián)過程，最終表現(xiàn)出激素的生物學效應。激素可分為膜受體激素及胞內受體激素。前者為蛋白質、多肽及兒茶酚胺類激素，具親水性，需結合膜身體才能將信號跨膜傳遞入細胞內。后者為疏水性激素，可透過細胞膜與胞內受體（大多在核內）結合，形成二聚體，作為轉錄因子與DNA上的特定激素反應元件（HRE）結合，以調控該元件調控的特定基因的表達。
（三）整體水平調節(jié)是指神經(jīng)系統(tǒng)通過內分泌腺間接調節(jié)代謝和直接影響組織、器官以調節(jié)代謝的方式，使機體代謝相對穩(wěn)定，適應環(huán)境改變。饑餓及應急時通過改變多種激素分泌，整體調節(jié)引起體內物質代謝的改變。
6.如何利用代謝調控提高微生物發(fā)酵產(chǎn)物的產(chǎn)量
微生物有著一整套可塑性極強和極精確的代謝調節(jié)系統(tǒng)，
以保證上千種酶能
正確無誤、
有條不紊地進行極其復雜的新陳代謝反應。
從細胞水平上來看，
微生
物的代謝調節(jié)能力要超過復雜的高等動植物。
這是因為，
微生物細胞的體積極小，
而所處的環(huán)境條件卻十分多變，
每個細胞要在這樣復雜的環(huán)境條件下求得生存和
發(fā)展，
就必須具備一整套發(fā)達的代謝調節(jié)系統(tǒng)。
在長期進化過程中，
微生物發(fā)展
出一整套十分有效的代謝調節(jié)方式，巧妙地解決了這一矛盾。
通過代謝調節(jié)微生物可最經(jīng)濟地利用其營養(yǎng)物，
合成出能滿足自己生長、
繁
殖所需要的一切中間代謝物，
并做到既不缺乏也不剩余任何代謝物的高效
“經(jīng)濟
核算”
正常情況下，微生物代謝產(chǎn)物由于反饋抑制和反饋阻遏是不會大量積累的。
但自然界里常發(fā)現(xiàn)一些微生物產(chǎn)生了過量的代謝產(chǎn)物，
這主要是由于這些微生物
代謝機制失調造成的，
在工業(yè)發(fā)酵上，
可運用遺傳的和環(huán)境的控制和人為的代謝
調節(jié)，使其產(chǎn)物大量積累。
如氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)就是在代謝調節(jié)研究的基礎上發(fā)展起來的。
目前已經(jīng)能夠
在轉錄和翻譯上控制微生物的代謝，
使微生物工業(yè)發(fā)酵進入了一個嶄新階段，
即
代謝控制發(fā)酵階段。所謂的代謝控制發(fā)酵，就是人為地在
DNA
分子水平上改變
和控制微生物的代謝活動，使目的產(chǎn)物大量生成、積累。
一般改變微生物代謝調節(jié)的方法有如下幾種
:
第一種
是采用物理化學誘變，獲得營養(yǎng)缺陷型
第二種方法是應用抗反饋調節(jié)突變法。
第三種就是控制發(fā)酵條件，改變細胞的滲透性。
