微生物表現(xiàn)型表示方法(微生物計數(shù)方法)
1.微生物計數(shù)方法有哪些
測定微生物計數(shù)的方法有很多，主要有以下幾種：
1.血細(xì)胞計數(shù)法
將稀釋的菌液樣品滴在血細(xì)胞計數(shù)板上，在顯微鏡下計算4~5個中格的細(xì)菌數(shù)，并求出每個小格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再以此為依據(jù)，估算總菌數(shù).
①此法的缺點是不能區(qū)分死菌和活菌.
②對壓在小方格界線上的細(xì)菌，應(yīng)當(dāng)取平均值計數(shù).
③此法可用于測定培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化
2.稀釋涂布平板法
原理：每個活細(xì)菌在適宜的培養(yǎng)基和良好的生長條件下可以通過生長形成菌落.培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌.
①這一方法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目
②統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，原因是當(dāng)兩個活多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落.因此統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含細(xì)菌、酵母、芽孢與孢子等的數(shù)量均可用此法測定.但不適于測定樣品中絲狀體微生物，例如放線菌或絲狀真菌或絲狀藍(lán)細(xì)菌等的營養(yǎng)體等.
④此法若不培養(yǎng)成菌落，可通過將一定量的菌液均勻地涂布在玻片上的一定面積上，經(jīng)固定染色后在顯微鏡下計數(shù)，這樣又稱涂片計數(shù)法.染色可用臺盼藍(lán)，臺盼藍(lán)能使死細(xì)胞染成藍(lán)色，可分別計數(shù)死細(xì)胞和活細(xì)胞.
3.濾膜法
濾膜法是當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時，可將一定體積的湖水、海水或飲用水燈樣品通過膜過濾器.然后將濾膜干燥、染色，并經(jīng)處理使膜透明，再在顯微鏡下計算膜上（或一定面積上）的細(xì)菌數(shù).
此法也可以通過培養(yǎng)觀察形成的菌落數(shù)來推算樣品中的菌數(shù).例如測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目：將已知體積的水過濾后，將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng).在該培養(yǎng)基上大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，可根據(jù)培養(yǎng)基上黑色菌落的數(shù)目，計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目.
此法也是統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目.
4.比濁法
原理是在一定范圍內(nèi)，菌是懸液中細(xì)胞濃度與混濁度成正比，即與光密度成正比，菌越多，光密度越大.因此可借助與分光光度計，在一定波長下，測定菌懸液的光密度，以光密度表示菌量.實驗測量時一定要控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi)，否則不準(zhǔn)確.
5.顯微鏡直接計數(shù)法
在課本生物選修1生物技術(shù)實踐P22中“除了上述活菌計數(shù)法外，顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量的常用方法.”這里說的顯微鏡直接計數(shù)，我認(rèn)為應(yīng)該是在稀釋涂布的基礎(chǔ)上不培養(yǎng)成菌落而通過染色的方法在顯微鏡下直接計數(shù).再如濾膜法也一樣，可以有兩種情況.
另外，微生物計數(shù)法發(fā)展迅速，多種多樣的快速、簡易、自動化的儀器和裝置等方法可以用來統(tǒng)計微生物的數(shù)目.
2.食品中微生物數(shù)量的表示方法是什么
微生物檢驗方法標(biāo)準(zhǔn) 1 食品微生物學(xué)檢驗 總則 GB 4789.1-2010 2 菌落總數(shù)測定 GB 4789.2-2010 3 大腸菌群計數(shù) GB 4789.3-2010 4 沙門氏菌檢驗 GB 4789.4-2010 5 金黃色葡萄球菌檢驗 GB4789.10-2010 6 霉菌和酵母計數(shù) GB4789.15-2010 7 乳與乳制品檢驗 GB4789.18-2010 8 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗 GB4789.30-2010 9 乳酸菌檢驗 GB 4789.35-2010 10 阪崎腸桿菌檢驗 GB4789.40-2010 11 志賀氏菌檢驗 GB 4789.5-2012 12 產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗 GB4789.13-2012 13 雙歧桿菌的鑒定 GB4789.34-2012 14 大腸埃希氏菌計數(shù) GB 4789.38-2012 15 副溶血性弧菌檢驗 GB4789.7-2013 16 商業(yè)無菌檢驗 GB4789.26-2013 17培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求 GB4789.28-2013 18沙門氏菌、志賀氏菌和致瀉大腸埃希氏菌的腸桿菌科噬菌體診斷檢驗 GB 4789.31-2013 19 糞大腸菌群計數(shù) GB 4789.39-2013 20 空腸彎曲菌檢驗 GB4789.9-2014 21 β型溶血性鏈球菌檢驗 GB4789.11-2014 22 蠟樣芽孢桿菌檢驗 GB4789.14-2014 23小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗 GB4789.8-2016 24 腸桿菌科檢驗 GB4789.41-2016。
3.菌落計數(shù)有哪些的方法
原發(fā)布者：jxc2520
食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定一、培養(yǎng)基和試劑1、平板計數(shù)瓊脂（platecountagar,PCA）培養(yǎng)基成分胰蛋白胨5.0g酵母浸膏2.5g葡萄糖1.0g瓊脂15.0g蒸餾水1000mLpH7.0±0.2制法：將上述成分加于蒸餾水中，煮沸溶解，調(diào)節(jié)pH。分裝試管或錐形瓶，121℃高壓滅菌15min。2、磷酸鹽緩沖液成分磷酸二氫鉀（KH2PO4）34.0g蒸餾水500mLpH7.2制法：貯存液：稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500mL蒸餾水中，用大約175mL的1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH，用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液：取貯存液1.25mL，用蒸餾水稀釋至1000mL，分裝于適宜容器中，121℃高壓滅菌15min。3、無菌生理鹽水成分氯化鈉8.5g蒸餾水1000mL制法：稱取8.5g氯化鈉溶于1000mL蒸餾水中，121℃高壓滅菌15min。二、操作步驟樣品的稀釋1、固體和半固體樣品：稱取25g樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min~10000r/min均質(zhì)1min~2min，或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min~2min，制成1:10的樣品勻液。2、液體樣品：以無菌吸管吸取25mL樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶（瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量
4.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法有哪些
統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法有直接計數(shù)法 和間接計數(shù)法兩種。
1. 直接計數(shù)法
直接計數(shù)法是將稀釋的樣品滴在計 數(shù)板上，蓋上蓋玻片，然后在顯微鏡下計 數(shù)4?5個中格的細(xì)菌數(shù)，并求出每個小 格所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按公式求出每 毫升樣品中所含的細(xì)菌數(shù)。計算公式 為：每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)=每小格平 均細(xì)菌數(shù)X400X1 000X稀釋倍數(shù)。這 種方法的優(yōu)點是所需設(shè)備比較簡單，能 迅速得到結(jié)果，而且在計數(shù)的同時還可 以觀察到所研究的微生物的形態(tài)特征； 缺點是不能區(qū)分死菌與活菌。
2. 間接計數(shù)法
在應(yīng)用稀釋涂布平板法計數(shù)時，首 先要將待測樣品配制成均勻的系列稀釋 液，盡量使微生物細(xì)胞分散開，再把稀釋 液接種到平板上，進(jìn)行培養(yǎng)觀察。但值 得注意的是，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌 的實際數(shù)目低，而且統(tǒng)計的結(jié)果一般用 菌落數(shù)而不用活菌數(shù)來表示。計算公式 為：每克樣品中的菌落數(shù)= （C+V）X M，其中，C表示某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V表示涂布平板時所 用的稀釋液的體積（mL）,M代表稀釋 倍數(shù)。
