生物堿的鑒別方法(生物堿的化學(xué)鑒定試驗(yàn)一般需要作幾種)

1.生物堿的化學(xué)鑒定試驗(yàn)一般需要作幾種

中草藥中生物堿的含量測(cè)定一般包括三個(gè)步驟——提取、分離精制與含量測(cè)定?，F(xiàn)將常用方法筒述如下：

1.提取： 稱(chēng)取一定量的藥材，根據(jù)生物堿的溶解性能堿化后用有機(jī)溶劑提取或用酸水或用乙醇提取得游離生物堿或其鹽類(lèi)。提取方法用冷浸法、滲漉法、口流提取法、離子交換法均可。

2.分離精制： 多用溶劑法。利用生物堿在酸水中成鹽，不溶于有機(jī)溶劑，堿化后游離易溶于有機(jī)溶劑的性質(zhì)，反復(fù)于分液漏斗中萃取精制。有時(shí)亦可加某些試劑使雜質(zhì)沉淀而除去或用氧化鋁柱層析法去除雜質(zhì)。

3.含量測(cè)定： 以容量法應(yīng)用最多，亦可用重量法、比色法、可見(jiàn)光與紫外光分光光度法、層析法等。容量法中又以酸堿滴定法較簡(jiǎn)便常用。即將用上述方法提取精制所得之生物堿溶于過(guò)量標(biāo)準(zhǔn)酸溶液中，用標(biāo)準(zhǔn)堿液回滴，從消耗的酸量算出生物堿的含量。

如果中草藥中所含生物堿不止一種，則測(cè)得的為總生物堿含量，而以其中主要生物堿為代表計(jì)算的近似值。如需準(zhǔn)確地測(cè)定某一生物堿的含量，則應(yīng)分離得個(gè)別生物堿后再行測(cè)定。

2.天然藥物化學(xué)中生物堿的結(jié)構(gòu)·理化性質(zhì)·提取分離方法·檢識(shí)鑒定

結(jié)構(gòu)類(lèi)型：由于生物堿的種類(lèi)很多，各具有不同的結(jié)構(gòu)式，因此彼此間的性質(zhì)會(huì)有所差異。但生物堿均為含氮的有機(jī)化合物，總有些相似的性質(zhì)，生物堿具環(huán)狀結(jié)構(gòu)，難溶于水，與酸可以形成鹽，有一定的旋光性和吸收光譜，大多有苦味。呈無(wú)色結(jié)晶狀，少數(shù)為液體。生物堿有幾千種，由不同的氨基酸或其直接衍生物合成而來(lái)，是次級(jí)代謝物之一，對(duì)生物機(jī)體有毒性或強(qiáng)烈的生理作用。

理化性質(zhì)：一般為無(wú)色，不論生物堿本身或其鹽類(lèi)，多具苦味，有些味極苦而辛辣，還有些刺激唇舌的焦灼感。 大多呈堿性反應(yīng)。但也有呈中性反應(yīng)的，如秋水仙堿；也有呈酸性反應(yīng)的，如茶堿和可可豆堿；也有呈兩性反應(yīng)的，如嗎啡（Morphine）和檳榔堿（Arecaadine）。大多數(shù)生物堿均幾乎不溶或難溶大多數(shù)生物堿含有不對(duì)稱(chēng)碳原子，有旋光性，多數(shù)呈左旋光性。只有少數(shù)生物堿，分子中沒(méi)有不對(duì)稱(chēng)碳原子，于水。能溶于氯仿、乙醚、酒精、丙酮、苯等有機(jī)溶劑。也能溶于稀酸的的水溶液而成鹽類(lèi)， 在常壓時(shí)絕大多數(shù)生物堿均無(wú)揮發(fā)性

提取分離：生物堿-水或酸水提取法

1）根據(jù)生物堿與酸成鹽后易溶于水、難溶于親脂性有機(jī)溶劑的性質(zhì)。

2）生物堿若具有一定堿性，在植物體內(nèi)都以鹽的形式存在，故可采用水或酸水提取中華醫(yī)學(xué)學(xué)/習(xí)網(wǎng)搜集整理。

3）生物堿多以有機(jī)酸鹽的形式存在，對(duì)水的溶解度較小，所以多選用無(wú)機(jī)酸水使植物體內(nèi)的生物堿大分子有機(jī)酸鹽轉(zhuǎn)變成小分子無(wú)機(jī)酸鹽，而增大其在水中的溶解度，故多用酸水提取。

4）常用0.1%~l%的硫酸或鹽酸溶液作為提取溶劑，采用浸漬法或滲漉法提取，個(gè)別含淀粉少者可用煎煮法。

5）缺點(diǎn)：此法比較簡(jiǎn)便，但提取液體積較大，濃縮困難，而且水溶性雜質(zhì)多，需進(jìn)一步采用下列方法純化和富集。

1.陽(yáng)離子樹(shù)脂交換法

生物堿陽(yáng)離子，能與陽(yáng)離子交換樹(shù)脂發(fā)生離子交換反應(yīng)，被交換到樹(shù)脂上。

操作：含有總堿的酸水提取液通過(guò)強(qiáng)酸型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂柱，使生物堿陽(yáng)離子交換到樹(shù)脂上，而非生物堿化合物則流出柱外，用中性水或乙醇進(jìn)一步洗除柱中的雜質(zhì)中華醫(yī)學(xué)學(xué)/習(xí)網(wǎng)搜集整理。

①堿化后用氯仿或乙醚提?。簩⒔粨Q后的樹(shù)脂晾干，用氨水堿化至pH值為l0左右，使生物堿從樹(shù)脂中游離出來(lái)，再用氯仿或乙醚等有機(jī)溶劑回流提取，回收溶劑即可得到總生物堿。

②堿性乙醇洗脫中華醫(yī)學(xué)學(xué)/習(xí)網(wǎng)搜集整理。

③ 酸水或酸性乙醇洗脫。

2.萃取法

酸水提取液堿化，使生物堿游離，如沉淀，則濾過(guò)即得；如不沉淀，可以適合的親脂性有機(jī)溶劑萃取，回收溶劑，即得總生物堿。

一般來(lái)說(shuō)，酸水提取，堿水沉淀是通用的方法，再找合適的溶劑將沉淀中的生物堿提取出來(lái)，就可以了。酸水中酸的量視生物堿的多少而定，一般都需要過(guò)量一些。

醇提取液

│

↓濃縮

浸膏

│

│酸水溶解

┌——————┴———————————┐

↓ ↓

不溶物 酸水液

（非堿性脂溶性雜質(zhì)） │

│堿化，親脂性有機(jī)溶劑萃取 [用氫氧化鈉調(diào)節(jié)到PH=10 ] ┌———┴———┐

↓ ↓

有機(jī)溶劑層 水層

│

│濃縮

↓

總生物堿

鑒別：1物性測(cè) 定 測(cè)定化合物的溶沸點(diǎn)、比旋光度等物理參數(shù) ， 與 已知生物堿的物理參數(shù)進(jìn)行 比較

2化學(xué)降解反應(yīng) 為經(jīng)典的結(jié)構(gòu)測(cè)定方法， 將分子降解為幾個(gè)穩(wěn)定 的碎片 ， 它們通常是一些比較易于鑒別或可通過(guò)合成 證明的簡(jiǎn)單化合物， 然后按降解原理推導(dǎo)出原來(lái)可能 的化學(xué)結(jié)構(gòu)

3氧化 反應(yīng) 是一種應(yīng)用于生物堿結(jié)構(gòu)研究的方法， 即通過(guò)將 化合物氧化裂解成小分子化合物推知該化合物環(huán)狀 結(jié)構(gòu)的類(lèi)型和取代基的種類(lèi)及位置。

4滴定法的原理是酸堿中和反應(yīng) 。人工滴定法是 根據(jù)指示劑的顏色變化指示滴定終點(diǎn)， 然后 目測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 溶液消耗體積， 計(jì)算分析結(jié)果。自動(dòng)電位滴定法是通 過(guò) 電位的變化 ， 由儀器 自動(dòng)判斷終點(diǎn)。滴定法簡(jiǎn) 便、經(jīng)濟(jì)、快速， 但相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較大。

5紫外吸收光譜法

6紅外光譜 法

7質(zhì)譜 法

8核 磁 共振譜

9高 效 液 相 色譜 法

氣 相 色譜 法

超 臨界 流體 色譜

毛細(xì)管電泳法