目前臨床正在使用和研究的耐藥性檢測(cè)方法歸納起來(lái),有表型檢 測(cè)和基因檢測(cè)兩大類。
表型檢測(cè)方法有常規(guī)藥敏試驗(yàn)方法、BACTE- CTB-960放射性液體培養(yǎng)基法、噬菌體生物擴(kuò)增法、熒光素酶信號(hào)噬菌 體法(LRP)、MTT法、流式細(xì)胞儀(FCM)測(cè)定法等?;驒z測(cè)方法有 直接測(cè)序法(DS)、聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析(PCR-SSCP)、PCR-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析(PCR-RFLP)、雙脫氧指紋圖法 (ddF)、反向系列探針雜交法(AiPA)、異源雙鏈形成法(HDF)、隨機(jī)擴(kuò) 增多態(tài)性DNA(RAPD)基因分型技術(shù)等。
多重耐藥菌監(jiān)測(cè)方案 一、多重耐藥菌(MDRO) 主要時(shí)指對(duì)臨床使用的三類或三類以上抗菌藥物同時(shí)呈現(xiàn)耐藥的細(xì)菌,常見的有耐甲氧金黃葡萄球菌(MRSA),耐萬(wàn)古霉素腸球菌(VRE),產(chǎn)超光譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLS)細(xì)菌,耐碳青霉稀類抗菌藥物腸桿菌(CRE),耐碳青霉稀類抗菌藥物鮑曼不動(dòng)桿菌(CR-AS),多重耐藥/泛耐藥性銅綠假單胞菌(MDR/PDR-PA)和多重耐藥結(jié)核分枝桿菌等 二、多重耐藥菌醫(yī)院感染的預(yù)防與控制 (一) 加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生 臨床科室特別是新生兒。血液科病房,呼吸科病房,神經(jīng)科病房等多重耐藥菌醫(yī)院感染重點(diǎn)科室,要配備足夠的洗手設(shè)施和速干手消毒液,提高醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生的依從性 醫(yī)務(wù)人員對(duì)患者實(shí)施以下診療,護(hù)理活動(dòng)過程中必須洗手或使用速干手消毒劑進(jìn)行手消毒 1在直接接觸患者前后 2進(jìn)行無(wú)菌技術(shù)操作和侵入性操作前后 3接觸患者使用的物品或處理患者分泌物,排泄物后 4摘手套后 (二)1應(yīng)對(duì)多重耐藥菌感染患者和定植患者實(shí)施隔離措施,首選單間隔離,也可以將同類多重耐藥菌感染者或定植者安置在同一房間,隔離病房不足時(shí)才考慮進(jìn)行床邊隔離不能與氣管插管,深靜脈留
置導(dǎo)管,有開放傷口或者免疫功能抑制患者安置在同一房間,當(dāng)感染者較多時(shí),應(yīng)保護(hù)性隔離未感染者 2放置隔離病房,應(yīng)在門上懸掛接觸隔離標(biāo)識(shí),控制無(wú)關(guān) 人員進(jìn)入,進(jìn)行床邊隔離時(shí),在床頭卡上粘貼接觸隔離標(biāo)識(shí),以提醒醫(yī)務(wù)人員以及家屬采取床邊隔離措施 3醫(yī)務(wù)人員對(duì)患者實(shí)施診療,護(hù)理操作時(shí),應(yīng)先診療護(hù)理 其它病人,將高度疑似和MDRO感染病人的診療護(hù)理操作安排在最后進(jìn)行 4應(yīng)盡量減少與感染者或定植者相接觸的醫(yī)務(wù)人員數(shù)量, 最好限制每班診療病人者為醫(yī)生,護(hù)士各一人,所有診療盡可能由專人完成,包括標(biāo)本的采集 5按照衛(wèi)生部《抗菌藥物臨床應(yīng)用指導(dǎo)原則》要求,嚴(yán)格 執(zhí)行無(wú)菌藥物臨床應(yīng)用的基本原則,正確合理使用抗菌藥物,減少或延緩多重耐藥菌的產(chǎn)生 6嚴(yán)格遵守?zé)o菌技術(shù)操作規(guī)程,特別是實(shí)施中心靜脈置管, 氣管切開,氣管插管,留置導(dǎo)尿放置引流管等侵入性操作時(shí),應(yīng)當(dāng)避免污染,減少感染的危險(xiǎn)因素 7在實(shí)施診療護(hù)理操作中,有可能接觸患者的傷口,潰爛 面,粘膜,體液,引流液,分泌物,排泄物時(shí),應(yīng)當(dāng)戴手套,與病人或其環(huán)境有大面積接觸或病人有大便失禁等情況時(shí),需要加穿隔離衣,離開病人床旁或房間時(shí),須把防護(hù)用品脫下,并洗手或用快速手消毒劑擦手
8對(duì)于直接接觸患者的診療器械,器具及物品(如血壓計(jì), 聽診器,體溫表,輸液架)等應(yīng)專人專用及時(shí)消毒,其它不能專人的物品(如輪椅,擔(dān)架)在每次使用后必須消毒 9對(duì)醫(yī)務(wù)人員和患者經(jīng)常接觸的物體表面,設(shè)備設(shè)施表面 (如心電監(jiān)護(hù)儀,呼吸機(jī),微量輸液泵等醫(yī)療儀器的面板或旋鈕表面。計(jì)算機(jī)鍵盤和鼠標(biāo),電話,患者床欄,門把手,水龍頭開關(guān)等)應(yīng)當(dāng)每天進(jìn)行擦拭消毒,被患者血液,體液污染時(shí),立即系哦阿杜,抹布等用具應(yīng)專用,使用過的抹布,拖布等必須消毒處理 10銳器放置在銳器盒中,其余醫(yī)療飛舞均放置在黃色垃 圾袋中按醫(yī)療廢物處置 11感染者或攜帶者應(yīng)隔離至連續(xù)3各標(biāo)本(每次間隔>24 小時(shí))培養(yǎng)均陰性,方可解除隔離
抗Hp治療失敗的原因可能是所使用的抗生素耐藥,故再次治療前常常需要評(píng)估Hp抗生素耐藥性。
傳統(tǒng)方法檢測(cè)Hp抗生素耐藥性主要局限于藥物敏感性試驗(yàn)。藥物敏感性試驗(yàn)簡(jiǎn)稱藥敏試驗(yàn)(或耐藥試驗(yàn)),旨在了解病原微生物對(duì)各種抗生素的敏感(或耐受)程度,以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素藥物的微生物學(xué)試驗(yàn)。
其包括抗生素濃度梯度法(E-test法)、紙片擴(kuò)散法和稀釋法(包括瓊脂和肉湯稀釋法)。紙片擴(kuò)散法是將含有定量抗生素藥物的濾紙片貼在已接種了測(cè)試菌的瓊脂表面上,紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散,隨著擴(kuò)散距離的增加,抗生素的濃度呈對(duì)數(shù)減少,從而在紙片的周圍形成濃度梯度。
同時(shí),紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的菌株不能生長(zhǎng),而抑菌范圍外的菌株則可以生長(zhǎng),從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈,抑菌圈的大小可以反映測(cè)試菌對(duì)藥物的敏感程度,并與該藥物對(duì)測(cè)試菌的最低抑菌濃度呈負(fù)相關(guān)。稀釋法分為瓊脂稀釋法和肉湯稀釋法。
實(shí)驗(yàn)時(shí),經(jīng)過倍比稀釋的抗生素濃度為能抑制待測(cè)菌肉眼可見生長(zhǎng)的最低藥物濃度(MIC)。 但藥敏試驗(yàn)有其缺點(diǎn),如E-test法耗材昂貴,紙片擴(kuò)散法缺乏有效的判斷標(biāo)準(zhǔn),瓊脂稀釋法對(duì)操作技術(shù)要求較高,而且藥敏試驗(yàn)不能鑒定Hp菌株基因突變的位點(diǎn)。
另外,Hp對(duì)培養(yǎng)要求苛刻,微需氧條件下生長(zhǎng)緩慢,不適合臨床常規(guī)開展。
病毒基因DNA定性定量檢測(cè)和高通量病毒基因變異(耐藥)生物芯片檢測(cè),對(duì)實(shí)現(xiàn)乙肝的科學(xué)轉(zhuǎn)陰有了堅(jiān)實(shí)的、精準(zhǔn)的數(shù)據(jù)支持,專家根據(jù)這些數(shù)據(jù)來(lái)判斷該病人是否需要治療、什么藥物有效,什么藥物無(wú)效,這樣的治療的方案成功的幾率相當(dāng)大。
如:若患者的P區(qū)基因發(fā)生突變,表明系長(zhǎng)期服用核苷類藥物所致,繼續(xù)服用可導(dǎo)致病情加重;X區(qū)變異的患者則極易發(fā)生爆發(fā)性肝病、肝硬化和肝腫瘤,需高度警惕;C區(qū)基因變異則表明采用干擾素?zé)o用;S區(qū)基因變異表明疫苗無(wú)效。據(jù)了解,這兩種高科技乙肝病毒檢測(cè)方法,對(duì)實(shí)驗(yàn)室的條件、操作者的技術(shù)等都有很高的要求。
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