細菌學(xué)檢驗方法(細菌學(xué)檢驗方法)
1.細菌學(xué)有哪些檢驗方法
細菌學(xué)的檢驗方法有： 1.涂片鏡檢 將病料涂于清潔無(wú)油污的載玻片上，干燥后在酒精燈火焰上固 定，選用單染色法（如美藍染色法）、革蘭氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色鏡檢，根據所觀(guān)察到的細 菌形態(tài)特征，作出初步診斷或確定進(jìn)一步檢驗的步驟。
2.分離培養 根據所懷疑傳染病病原菌的特點(diǎn)，將病料接種于適宜的細菌培 養基上，在一定溫度（常為37°C）下進(jìn)行培養，獲得純 培養苗后，再用特殊的培養基培養，進(jìn)行細菌的形態(tài)學(xué)、培養特 征、生化特性、致病力和抗原特性鑒定。 3.動(dòng)物實(shí)驗 用滅菌生理鹽水將病料做成1 : 10懸液，或利用分離培養獲得的細菌液感染實(shí)驗動(dòng)物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。
感染方法可用皮下、肌內、腹腔、靜脈或腦內注射。感染后按常規隔離 伺養管理，注意觀(guān)察，有時(shí)還需對某種實(shí)驗動(dòng)物測量體溫；如有死亡，應立即進(jìn)行剖檢及細菌學(xué)檢查。
2.細菌學(xué)檢驗基本技術(shù)有哪些
1.涂片鏡檢
將病料涂于清潔無(wú)油污的載玻片上，干燥后在酒精燈火焰上固 定，選用單染色法（如美藍染色法）、革蘭氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色鏡檢，根據所觀(guān)察到的細 菌形態(tài)特征，作出初步診斷或確定進(jìn)一步檢驗的步驟。
2.分離培養
根據所懷疑傳染病病原菌的特點(diǎn)，將病料接種于適宜的細菌培 養基上，在一定溫度（常為37°C）下進(jìn)行培養，獲得純 培養苗后，再用特殊的培養基培養，進(jìn)行細菌的形態(tài)學(xué)、培養特 征、生化特性、致病力和抗原特性鑒定。
3.動(dòng)物實(shí)驗
用滅菌生理鹽水將病料做成1 : 10懸液，或利用分離培養獲得的細菌液感染實(shí)驗動(dòng)物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。感染方法可用皮下、肌內、腹腔、靜脈或腦內注射。感染后按常規隔離 伺養管理，注意觀(guān)察，有時(shí)還需對某種實(shí)驗動(dòng)物測量體溫；如有死亡，應立即進(jìn)行剖檢及細菌學(xué)檢查。
3.細菌鑒定辦法有哪些,詳細些哦~~
一 淀粉水解試驗 （一）實(shí)驗原理 細菌對大分子的淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪不能直接利用，必須靠產(chǎn)生的胞外酶，如淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶將大分子物質(zhì)分解。
胞外酶能分泌擴散到細胞外，將物質(zhì)分解成小單位如糖、氨基酸、甘油與脂肪酸。這些小單位的物質(zhì)能被細菌吸收和利用。
水解過(guò)程可通過(guò)底物的變化來(lái)證明，如細菌水解淀粉的區域，用碘測定不再產(chǎn)生藍色；水解明膠可觀(guān)察到明膠被液化；脂肪水解后產(chǎn)生脂肪酸改變培養基的pH，其中的中性紅指示劑使培養基從淡紅色變?yōu)樯罴t色。（二）實(shí)驗方法 將淀粉培養基溶化后，冷至45℃左右，以無(wú)菌操作制成平板。
取18-24h的純培養物點(diǎn)于平板上，每皿可點(diǎn)種3-5個(gè)菌株，適溫培養2-4d，形成菌落后，在平板上滴加盧戈氏碘液，以鋪滿(mǎn)菌落周?chē)鸀槎龋桨宄伤{色。如果菌落周?chē)袩o(wú)色透明圈出現，說(shuō)明淀粉已經(jīng)被水解，實(shí)驗為陽(yáng)性，否則為陰性。
透明圈的大小一般說(shuō)明水解淀粉的能力。（三）實(shí)驗試劑的配制 肉湯蛋白胨瓊脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂17g，蒸餾水1000mL,pH7.2。
淀粉培養基制法：在肉湯蛋白胨瓊脂中添加0.2%的可溶性淀粉，校正pH值至7.6，分裝三角瓶，121℃ 20min滅菌備用。盧戈氏（Lugol）碘液：碘片1g，碘化鉀2g，蒸餾水300ml，先將碘化鉀溶解在少量水中，再將碘片溶解在碘化鉀溶液中，混勻，定容。
二 糖發(fā)酵試驗（一）實(shí)驗原理 單糖發(fā)酵是將葡萄糖，乳糖或麥芽糖等分別加入蛋白胨水培養基內，使其最終濃度為0.75-1%。并加入一定量酚紅指示劑及小倒管，制成單糖發(fā)酵管，接種細菌經(jīng)37℃培養18-24小時(shí)，若能分解糖產(chǎn)酸則酚紅指示劑由紅變黃，若能分解甲酸有CO2和H2等氣體形成，小倒管內則聚集有氣泡；不分解，則指示劑不變色。
（二）實(shí)驗材料 1.菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18-24小時(shí)瓊脂斜面培養物。 2.培養基：葡萄糖發(fā)酵管，乳糖發(fā)酵管等。
（三）實(shí)驗方法1.將傷寒桿菌，大腸桿菌按照液體接種方法分別接種于葡萄糖及乳糖發(fā)酵管內。 2.置37℃孵箱培養18-24小時(shí)。
3.觀(guān)察結果：由于一些細菌能分解某種糖類(lèi)產(chǎn)酸，所以培養基中pH下降到7.0以下，在酚紅指示劑的顯示下，培養基顏色由紅變黃。產(chǎn)酸者以“+”表示，如果同時(shí)產(chǎn)生氣體，則培養基中小倒管內有氣泡出現，此乃產(chǎn)酸又產(chǎn)氣，以“⊕”表示，不分解，則指示劑不變色，用“-”表示。
（四）實(shí)驗結果 傷寒桿菌 大腸桿菌 葡萄糖 + ⊕ 乳 糖 - ⊕ （五）實(shí)驗試劑的配制1.單糖發(fā)酵管的制備： 成分：蛋白胨水培養基 100ml ,0.2%酚紅 1ml ，所需糖（葡萄糖或乳糖）0.75-1g 制法： （1）將上述成分溶化，混勻分裝于內含有倒置小玻璃管的小試管中，每管約2ml，加塞。 （2）小倒管排氣，滅菌（8-10磅，20-30分鐘），貯存備用。
用途：供單糖發(fā)酵試驗用。 2.0.2%酚紅配制法 酚紅（phenol red）0.2g ,0.lmol/LNaOH 8ml ，蒸餾水 92ml 將酚紅入研缽徐徐加入0.lmol/LNaOH研磨，再補足蒸餾水即成。
若需長(cháng)時(shí)間保存，可高壓滅菌后貯存備用。 三 甲基紅（M.R）試驗（一）實(shí)驗原理 某些細菌如大腸桿菌等分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，繼而分解為甲酸、乙酸、乳酸等，使培養基pH值降至4.5以下，加入甲基紅指示劑呈紅色，此為陽(yáng)性反應；若產(chǎn)酸量少或產(chǎn)生的酸進(jìn)一步轉化為醇、醛、氣體和水等，則培養基的酸堿度仍在pH 6.2以上，加入甲基紅指示劑呈現黃色，為陰性反應。
（二）實(shí)驗材料1. 菌種：大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌18-24h瓊脂斜面培養物。 2. 培養基：葡萄糖蛋白胨水培養基。
3. 試劑：甲基紅試劑。 （三）實(shí)驗方法1. 分別將大腸桿菌，產(chǎn)氣桿菌接種于兩支葡萄糖蛋白胨水培養基中。
2. 置37℃培養2-3天取出，分別滴加甲基紅試劑2-3滴，混勻，觀(guān)察結果。 （四）實(shí)驗結果 大腸桿菌：+，產(chǎn)氣桿菌：-。
（五）實(shí)驗試劑的配制1.甲基紅試劑的配制 甲基紅 0.04g, 95%酒精 60ml ， 蒸餾水 40ml 。先使甲基紅溶解于酒精中，再加入蒸餾水，混合，搖勻即成。
2.葡萄糖蛋白胨水培養物 成分：蛋白胨5g 葡萄糖5g 制法： （1）將上述成分溶解于蒸餾水中。 （2）調節pH至7.6，用濾紙過(guò)濾除渣。
（3）分裝中試管，每管約3-4ml，滅菌后備用。 用途：供甲基紅及V-P試驗用。
四 產(chǎn)吲哚（indole）試驗（一）實(shí)驗原理 某些細菌如大腸桿菌，變形桿菌等具有色氨酸酶，能分解蛋白胨水培養基中的色氨酸，產(chǎn)生靛基質(zhì)（無(wú)色吲哚），再與歐立希試劑（對二甲基氨基苯甲醛）反應，形成紅色化合物—玫瑰吲哚，即為陽(yáng)性反應。 （二）實(shí)驗材料1. 菌種：大腸桿菌，傷寒桿菌18-24小時(shí)瓊脂斜面培養物。
2. 培養基：蛋白胨水培養基。 3. 試劑，歐立希（Ehrlich）試劑（對二甲基氨基苯甲醛） （三）實(shí)驗方法1. 分別將大腸桿菌，傷寒桿菌接種于兩支蛋白胨水培養基中。
2. 置37℃培養2-3天后，每管沿管壁各加歐立希試劑0.5-1ml于培養液面上，待1-2分鐘后觀(guān)察結果：在交界面出現玫瑰紅色環(huán)即為吲哚試驗陽(yáng)性，無(wú)紅色環(huán)即為陰性。 （四）實(shí)驗結果 大腸桿菌：+ ；傷寒桿菌：- 。
（五）實(shí)驗試劑的配制1.蛋白胨水培養基的制備 成分：蛋白胨10g 氯化鈉5g 蒸餾水1000ml 制法： （1）先用少量蒸餾水將蛋白胨和氯化鈉相混合溶解，再加足蒸餾水量。 。
4.病原微生物中細菌常見(jiàn)檢測方法有哪些
細菌 [what]什么是細菌？細菌（英文：germs;bacteria）隸屬生物學(xué)一類(lèi)，是在自然界分布最廣、個(gè)體數量最多的有機體，是大自然物質(zhì)循環(huán)的主要參與者。
細菌主要由細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核質(zhì)體等部分構成，有的細菌還有夾膜、鞭毛、菌毛等特殊結構。絕大多數細菌的直徑大小在0.5~5μm之間。
可根據形狀分為三類(lèi)，即：球菌、桿菌和螺旋菌（包括弧形菌）。 還有一種利用細菌的生活方式來(lái)分類(lèi)，即可分為兩大類(lèi)：腐生生活與寄生生活。
（一）細胞壁 細胞壁厚度因細菌不同而異，一般為15-30nm。主要成分是肽聚糖，由n-乙酰葡糖胺和n-乙酰胞壁酸構成雙糖單元，以β（1-4）糖苷鍵連接成大分子。
n-乙酰胞壁酸分子上有四肽側鏈，相鄰聚糖纖維之間的短肽通過(guò)肽橋（革蘭氏陽(yáng)性菌）或肽鍵（革蘭氏陰性菌）橋接起來(lái)，形成了肽聚糖片層，像膠合板一樣，粘合成多層。 肽聚糖中的多糖鏈在各物種中都一樣，而橫向短肽鏈卻有種間差異。
革蘭氏陽(yáng)性菌細胞壁厚約20~80nm，有15-50層肽聚糖片層，每層厚1nm，含20-40%的磷壁酸（teichoic acid），有的還具有少量蛋白質(zhì)。革蘭氏陰性菌細胞壁厚約10nm，僅2-3層肽聚糖，其他成分較為復雜，由外向內依次為脂多糖、細菌外膜和脂蛋白。
此外，外膜與細胞之間還有間隙。 肽聚糖是革蘭陽(yáng)性菌細胞壁的主要成分，凡能破壞肽聚糖結構或抑制其合成的物質(zhì)，都有抑菌或殺菌作用。
如溶菌酶是n-乙酰胞壁酸酶，青霉素抑制轉肽酶的活性，抑制肽橋形成。 細菌細胞壁的功能包括：保持細胞外形；抑制機械和滲透損傷（革蘭氏陽(yáng)性菌的細胞壁能耐受20kg/cm2的壓力）；介導細胞間相互作用（侵入宿主）；防止大分子入侵；協(xié)助細胞運動(dòng)和分裂。
脫壁的細胞稱(chēng)為細菌原生質(zhì)體（bacterial protoplast）或球狀體（spheroplast，因脫壁不完全），脫壁后的細菌原生質(zhì)體，生存和活動(dòng)能力大大降低。 （二）細胞膜 是典型的單位膜結構，厚約8~10nm，外側緊貼細胞壁，某些革蘭氏陰性菌還具有細胞外膜。
通常不形成內膜系統，除核糖體外，沒(méi)有其它類(lèi)似真核細胞的細胞器，呼吸和光合作用的電子傳遞鏈位于細胞膜上。某些行光合作用的原核生物（藍細菌和紫細菌），質(zhì)膜內褶形成結合有色素的內膜，與捕光反應有關(guān)。
某些革蘭氏陽(yáng)性細菌質(zhì)膜內褶形成小管狀結構，稱(chēng)為中膜體（mesosome）或間體（圖3-11），中膜體擴大了細胞膜的表面積，提高了代謝效率，有擬線(xiàn)粒體（chondroid）之稱(chēng)，此外還可能與dna的復制有關(guān)。 （三）細胞質(zhì)與核質(zhì)體 細菌和其它原核生物一樣，沒(méi)有核膜，dna集中在細胞質(zhì)中的低電子密度區，稱(chēng)核區或核質(zhì)體（nuclear body）。
細菌一般具有1-4個(gè)核質(zhì)體，多的可達20余個(gè)。核質(zhì)體是環(huán)狀的雙鏈dna分子，所含的遺傳信息量可編碼2000~3000種蛋白質(zhì)，空間構建十分精簡(jiǎn)，沒(méi)有內含子。
由于沒(méi)有核膜，因此dna的復制、rna的轉錄與蛋白的質(zhì)合成可同時(shí)進(jìn)行，而不像真核細胞那樣這些生化反應在時(shí)間和空間上是嚴格分隔開(kāi)來(lái)的。 每個(gè)細菌細胞約含5000~50000個(gè)核糖體，部分附著(zhù)在細胞膜內側，大部分游離于細胞質(zhì)中。
細菌核糖體的沉降系數為70s，由大亞單位（50s）與小亞單位（30s）組成，大亞單位含有23srrna,5srrna與30多種蛋白質(zhì)，小亞單位含有16srrna與20多種蛋白質(zhì)。30s的小亞單位對四環(huán)素與鏈霉素很敏感，50s的大亞單位對紅霉素與氯霉素很敏感。
細菌核區dna以外的，可進(jìn)行自主復制的遺傳因子，稱(chēng)為質(zhì)粒（plasmid）。質(zhì)粒是裸露的環(huán)狀雙鏈dna分子，所含遺傳信息量為2~200個(gè)基因，能進(jìn)行自我復制，有時(shí)能整合到核dna中去。
質(zhì)粒dna在遺傳工程研究中很重要，常用作基因重組與基因轉移的載體。 胞質(zhì)顆粒是細胞質(zhì)中的顆粒，起暫時(shí)貯存營(yíng)養物質(zhì)的作用，包括多糖、脂類(lèi)、多磷酸鹽等。
（四）其他結構 許多細菌的最外表還覆蓋著(zhù)一層多糖類(lèi)物質(zhì)，邊界明顯的稱(chēng)為莢膜（capsule），如肺炎球菌，邊界不明顯的稱(chēng)為粘液層（slime layer），如葡萄球菌。莢膜對細菌的生存具有重要意義，細菌不僅可利用莢膜抵御不良環(huán)境；保護自身不受白細胞吞噬；而且能有選擇地粘附到特定細胞的表面上，表現出對靶細胞的專(zhuān)一攻擊能力。
例如，傷寒沙門(mén)桿菌能專(zhuān)一性地侵犯腸道淋巴組織。細菌莢膜的纖絲還能把細菌分泌的消化酶貯存起來(lái)，以備攻擊靶細胞之用。
鞭毛是某些細菌的運動(dòng)器官，由一種稱(chēng)為鞭毛蛋白（flagellin）的彈性蛋白構成，結構上不同于真核生物的鞭毛。細菌可以通過(guò)調整鞭毛旋轉的方向（順和逆時(shí)針）來(lái)改變運動(dòng)狀態(tài)。
菌毛是菌體表面極其的蛋白纖細，須用電鏡觀(guān)察。特點(diǎn)是：細、短、直、硬、多，菌毛與細菌運動(dòng)無(wú)關(guān)，根據形態(tài)、結構和功能，可分為普通菌毛和性菌毛兩類(lèi)。
前者與細菌吸附和侵染宿主有關(guān)，后者為中空管子，與傳遞遺傳物質(zhì)有關(guān)。 （五）繁殖 細菌一二分裂的方式繁殖，某些細菌處于不利的環(huán)境，或耗盡營(yíng)養時(shí)，形成內生孢子，又稱(chēng)芽孢，是對不良環(huán)境有強抵抗力的休眠體，由于芽胞在細菌細胞內形成，故常稱(chēng)為內生孢子。
芽孢的生命力非常頑強，有些湖底沉積土中的芽抱桿茵經(jīng)500-1000年后仍有活力，肉毒梭菌的芽孢在ph 7.0時(shí)能耐受100℃煮沸5-9.5小。
5.細菌檢測最簡(jiǎn)單的方法
原發(fā)布者：龍源期刊網(wǎng)
目前有哪種微生物測試方法能夠在6~8個(gè)小時(shí)內顯示食品和食品生產(chǎn)環(huán)境清潔度的微生物水平？食品和飲料生產(chǎn)公司的答案是令人失望的：沒(méi)有！細菌總數、大腸菌群以及大腸桿菌平板計數通常可以對食品樣品以及表面處理環(huán)境的微生物水平進(jìn)行評估，然而檢測結果需要在24~72小時(shí)之后獲得。而采用顯色培養基進(jìn)行的特殊細菌測試，獲得檢測結果的時(shí)間會(huì )更長(cháng)，如果采用外部實(shí)驗室的方法，那么從樣品收集到獲得檢測結果要在3~5天。盡管快速自動(dòng)的檢測系統是可行的，但是這些檢測方法也需要一天以上的時(shí)間，且對于大多數的公司來(lái)講檢測費用較為昂貴，檢測方法也較為復雜。相比之下，食品公司一般會(huì )采用外部實(shí)驗室進(jìn)行微生物檢測。受方法的科學(xué)局限、靈敏度的約束、分析的復雜程度以及高昂費用等因素的影響，盡管面對需要盡快獲得產(chǎn)品檢測結果的情況，但大多數的食品飲料生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)者也不得不采用延遲獲得檢測結果的技術(shù)對產(chǎn)品進(jìn)行檢測。目前研發(fā)出一種被AOAC（美國分析化學(xué)家協(xié)會(huì )）認證的，操作十分簡(jiǎn)單，能夠在當天獲得產(chǎn)品指示微生物如大腸菌群、大腸桿菌以及總需氧微生物的檢測結果的新的檢測平臺，這種新型的檢測平臺被稱(chēng)為
6.細菌形態(tài)學(xué)檢查常用的方法有什么
細菌形態(tài)學(xué)檢查方法：常用染色方法
1.美藍染色法
在已干燥、固定好的抹片上，滴加適量的美藍染色液，經(jīng)1一2分鐘，水洗，干后鏡檢，結果是細菌呈藍色。
2.稀釋石炭酸復紅染色法
染色方法同美藍染色法，結果是細菌呈紅色。
3.革蘭（Gram）氏染色法
(1)在已干燥、固定好的抹片上，滴加草酸按結晶紫染色液，染色2一3分鐘，水洗。
(2)加革蘭氏碘液于抹片上媒染1一2分鐘，水洗。
(3)加95%酒精于抹片上脫色，約30秒至1分鐘，水洗。
(4)加稀釋石炭酸復紅（或沙黃水溶液）復染50一60秒鐘，水洗。干后鏡檢。結果是細菌染成藍紫色的稱(chēng)為革蘭氏陽(yáng)性細菌，染成紅色的稱(chēng)為革蘭氏陰性細菌。
7.便常規的細菌學(xué)檢查方法是什么
大便是由人體消化后形成的廢物，是由食物經(jīng)過(guò)食道、胃、小腸、大腸后產(chǎn)生的代謝廢物。一般而言，大便的顏色、性狀對疾病的診斷很有幫助，而顯微鏡檢查則對確定疾病的性質(zhì)較為重要。由于人體的消化系統的復雜以及寶寶消化道的相對脆弱，所以，化驗大便可以知道消化管道上某一部份的，甚至某特定部份的機能上或器質(zhì)上的病變，作為判斷寶寶的消化道疾病重要手段。
注意事項是用竹簽或木片采取約蠶豆大一塊新鮮糞便，裝入專(zhuān)門(mén)留取標本的紙盒內，寫(xiě)上姓名，立即送檢；如大便有膿血時(shí)，應留取膿血部分；水樣便要用容器留送；檢查寄生蟲(chóng)時(shí)要在糞便各部分都留一點(diǎn)。
正常人的糞便為黃褐色成形軟便.嬰兒糞便多呈淡黃或者黃色。正常嬰幼兒多為稀糊狀，無(wú)紅細胞和膿細胞。
便常規的細菌學(xué)檢查：腸道致病菌檢查，主要是靠培養分離與鑒定，但有時(shí)也可以直接涂片、鏡檢。
霍亂弧菌：用懸滴法可觀(guān)察其特有形態(tài)與運動(dòng)方式。
偽膜性腸炎：涂片、染色后查找葡萄球菌、念珠菌或梭形菌。
腸結核：涂片、耐酸染色查找結核分枝桿菌。
念珠菌性腸炎：涂片、鏡檢可找到酵母樣芽生孢子和假菌絲。
某些腹瀉患者：涂片可見(jiàn)大量八疊球菌及人體酵母菌，后者在形態(tài)上易與白細胞或原蟲(chóng)包囊混淆，可用蒸餾水代替生理鹽水作糞便涂片，此時(shí)人體酵母功很快破裂消失，而白細胞或原蟲(chóng)包囊則不易破壞。
8.常見(jiàn)的尿細菌學(xué)檢查方法有哪些
尿細菌學(xué)檢查對診斷尿路感染具有重要價(jià)值。
主要有以下兩種 方法。 （1）尿涂片找細菌。
尿路細菌感染時(shí)尿中含有大量細菌，尿液 涂片鏡檢易找到細菌。每高倍視野細菌數少于10個(gè)或未找到，提示 中段尿培養陰性或菌落數低于10 V ml。
如果細菌數為15?30個(gè)/高 倍視野，中段尿培養菌落數常大于105/ml。 據中山醫科大學(xué)葉任高 教授經(jīng)驗，其可靠率為90%以上。
并認為，即使已開(kāi)始使用抗生素的病例，尿培養陰性，尿沉渣革蘭染色找細菌仍有可能找到，這樣 就可彌補在應用抗生素的情況下尿細菌培養陰性的缺點(diǎn)。另外，應 用革蘭染色涂片找細菌可以初步確定尿路感染是陽(yáng)性球菌或陰性桿 菌，作為使用抗菌藥物的參考。
（2）尿液細菌培養。正常人尿內有一定數量的細菌，尿道口周 圍亦有大量細菌。
正常人尿道口及陰道存在以下細菌：表皮葡萄球菌、鏈球菌、枯草桿菌、假白喉棒狀桿菌、變形桿菌、大腸桿菌、乳酸桿菌、卡他布蘭漢氏菌及恥垢分枝桿菌等。外陰沖洗不凈，細菌常混人尿中， 但細菌數小于103/ml。
尿細菌培養的目的主要是運用中段尿培養菌 落計數的方法以鑒別是否為尿路感染。 若尿菌落數大于10 V ml為感染，準確率約80%；細菌數小于 103/ml或有多種細菌生長(cháng)，為污染所致，無(wú)臨床意義。
但值得注 意的是球菌，特別是糞球菌及腸球菌繁殖緩慢，其尿菌落數若為 103 ~ 104/ml之間，即有診斷價(jià)值；細菌數在103 ~105/ml者不能排 除感染，考慮是否因應用抗生素、清洗消毒劑混入、尿過(guò)頻、細菌 生長(cháng)緩慢等因素所致，必要時(shí)復查。 不論中段尿，還是導尿，都不可避免前尿道細菌的污染。
因此， 做細菌培養而不加含菌量計數，結果很不可靠。但在常規消毒下做 膀胱穿刺取尿作定性卻很可靠，只要培養出細菌，不論細菌數多少，均認為是感染，不會(huì )出現假陽(yáng)性。
尿細菌定量培養結果很可靠，但 遇到下列情況時(shí)需做膀胱穿刺尿培養：沒(méi)有條件做尿含菌量計數的 單位，在診斷上有閑難時(shí)；高度懷疑有尿路感染而尿含菌量卻低； 反復尿定量細菌培養結果均可疑者；要進(jìn)一步確定是否有混合感染 存在；可疑的厭氧菌所致者。 以上情況均考慮做膀胱穿刺尿培養。
方法如下：鼓勵患者飲水，使膀胱充盈至恥骨聯(lián)合以上，捫及膀胱 后即可穿刺。先剎毛、消毒，用9號10 cm長(cháng)的針頭連接注射器，在 恥骨聯(lián)合上方正中線(xiàn)穿入皮膚，然后猛力穿入膀胱，將尿液收集于 無(wú)菌試管送檢。
拔針后用無(wú)菌紗布覆蓋。 本法是避免污染的最好方法。
缺點(diǎn)是患者有一定的痛苦。 急性泌尿系感染多為單種細菌，大腸桿菌占60% ~ 80%，余為 金黃色葡萄球菌、變形桿菌、糞腸球菌；慢性感染常混合其他細菌； 綠膿桿菌多在手術(shù)或插管后引起感染。
9.衛生細菌學(xué)檢查標準
衛生細菌學(xué)檢查
大腸桿菌不斷隨糞便排出體外，污染周?chē)h(huán)境和水源、食品等。取樣檢查時(shí)，樣品中大腸桿菌越多，表示樣品被糞便污染越嚴重，也表明樣品中存在腸道致病菌的可能性越大。故應對飲水、食品、飲料進(jìn)行衛生細菌學(xué)檢查。
細菌總數：檢測每毫升或每克樣品中所含細菌數，采用傾注培養計算。我國規定的衛生標準是每毫升飲水中細菌總數不得超過(guò)100個(gè)。
大腸菌數指數：指每立升中大腸菌群數，采用乳糖發(fā)酵法檢測。我國的衛生標準是每1000ml飲水中不得超過(guò)3個(gè)大腸菌群；瓶裝汽水、果汁等每100ml大腸菌群不得超過(guò)5個(gè)。
