薄層色譜板都顯色方法(薄層色譜顯色規(guī)律是什么)
1.薄層色譜顯色規(guī)律是什么
薄層色譜的顯色要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，具體分為幾大類：
1、待分析成分本身具有紫外吸收，在紫外光燈下有明顯特殊顏色的熒光。如當(dāng)歸的鑒別，點樣后的薄層色譜板在展開后，取出，晾干，置于紫外光燈下（365nm）下檢視。
2、待分析成分顏色不明顯，需要噴顯色劑才可以檢視出斑點，還可以置于紫外光燈下檢視。如黃芪的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，10%的硫酸乙醇溶液噴霧后，在105攝氏度加熱約5min，供試品圖譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點；置紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同的橙色斑點。
3、待分析成分的顏色很淺，可以噴顯色劑顯色后，再檢視。如木香的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105攝氏度加熱5min，再檢視。
4、待分析成分的顏色很深，展開后晾干，斑點的顏色較明顯，易直接檢視。但這種情況較少。
注：顯色中以上1和3情況應(yīng)用較多。薄層板在展開后多需要噴顯色劑，顯色劑的選擇要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，比如生物堿類多用改良碘化鉍鉀做顯色劑，但麻黃堿而又用茚三酮為顯色劑，蒽醌類成分噴稀NaOH做顯色劑等等，在噴顯色劑時不宜噴得太多，噴得霧滴不要太大，否則斑點顯色不好而不易檢視，多總結(jié)即可在實驗操作應(yīng)用。另外，紫外光燈下檢視的波長有254nm和365nm，但一般365nm應(yīng)用較多。
2.薄層色譜的顯示定位方法有哪些
a 光學(xué)檢出法
a自然光（400~800nm）
b紫外光（254nm或365nm）
c熒光一些化合物吸收了較短波長的光，在瞬間發(fā)射出比照射光波長更長的光，而在紙或薄層上顯出不同顏色的熒光斑點（靈敏度高、專屬性高）
b 蒸汽顯色法
顯色
多數(shù)有機化合物吸附碘蒸氣后顯示不同程度的黃褐色斑點，這種反應(yīng)有可逆及不可逆兩種情況，前者在離開碘蒸氣后，黃褐色斑點逐漸消退，并且不會改變化合物的性質(zhì)，且靈敏度也很高，故是定位時常用的方法；后者是由于化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強了共軛體系，因此在紫外光下可以發(fā)出強烈而穩(wěn)定的熒光，對定性及定量都非常有利，但是制備薄層時要注意被分離的化合物是否改變了原來的性質(zhì)。
c 物理顯色法
用紫外照射分離后的紙或薄層后，使化合物產(chǎn)生光加成，光分解、光氧化還原及光異構(gòu)等光化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生某些變化，如形成熒光發(fā)射功能團。發(fā)生熒光增強或淬滅及熒光物質(zhì)的激發(fā)或發(fā)射波長發(fā)生移動等現(xiàn)象，從而提高了分析的靈敏度和選擇性。
d 試劑顯色法
廣泛應(yīng)用的定位方法。用于紙色譜的顯色劑一般都適用于薄層色譜，還有防腐劑的顯色劑不適合用于紙色譜及含有有機黏合劑薄層的顯色，又時噴顯色劑后續(xù)加熱，這也不是用于紙色譜。
顯色方法a噴霧顯色：顯色劑溶液以氣溶膠的形式均勻的噴灑在紙和薄層。b 浸漬顯色：揮去展開劑的薄層板，垂直的插入盛有展開劑的浸漬槽中，設(shè)定浸板及抽出速度和規(guī)定在顯色劑中浸漬的時間。
顯色試劑
a 通用顯色劑硫酸溶液（硫酸：水 1:1，硫酸：乙醇1:1）、0.5%碘的氯仿溶液、中性0.05%高錳酸鉀溶液、堿性高錳酸鉀溶液（還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色斑點）
b 專屬顯色劑
3.常用的tlc顯色方法,顯色劑有哪些
TLC 顯色試劑的選擇 顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機化合物的通用顯色 劑；另一類是根據(jù)化合物分類或特殊官能團設(shè)計的專屬性顯色劑。
通用顯色劑 硫酸 常用的有四種溶液：硫酸- 水（1:1） 溶液；硫酸- 甲醇或乙醇（1:1） 溶液；1.5mol/L 硫酸溶液與0.5-1.5mol/L 硫酸銨溶液，噴后110 ℃烤15min ，不同有機 化合物顯不同顏色。0.5 %碘的氯仿溶液 對很多化合物顯黃棕色。
中性0.05 %高錳酸鉀溶液 易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。堿性高錳酸鉀試劑 還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色。
溶液 I :1% 高錳酸鉀溶液；溶液 II :5% 碳酸鈉溶液；溶液 I 和溶液 II 等量混合應(yīng)用。酸性高錳酸鉀試劑 噴1.6% 高錳酸鉀濃硫酸溶液（ 溶解時注意防止爆炸） ，噴 后薄層于180 o C 加熱15 ~20min 。
酸性重鉻酸鉀試劑 噴5% 重鉻酸鉀濃硫酸溶液，必要時150 o C 烤薄層。5% 磷鉬酸乙醇溶液噴后120 o C 烘烤，還原性化合物顯藍色，再用氨氣薰，則背景變 為無色。
專屬性顯色劑 由于化合物種類繁多，因此專屬性顯色劑也是很多的，現(xiàn)將在各類化合物中 最常用的顯色劑列舉如下：（1） 烴類 ①硝酸銀/ 過氧化氫 檢出物：鹵代烴類 溶液：硝酸銀0.1g 溶于水1ml ，加2- 苯氧基乙醇 l00ml ，用丙酮稀釋至200ml ，再加30% 過氧化氫1 滴。方法：噴后置未過濾的紫外光下照射；結(jié)果：斑點呈暗黑色。
②熒光素/ 溴 檢出物：不飽和烴 溶液：I .熒光素0.1g 溶于乙醇100ml ;II .5% 溴的四氯化碳溶液。方法：先噴（I） ，然后置含溴蒸氣容器內(nèi)，熒光素轉(zhuǎn)變?yōu)樗匿鍩晒馑兀?曙紅） ，熒光 消失，不飽和烴斑點由于溴的加成，阻止生成曙紅而保留熒光，多數(shù)不飽和烴在 粉紅色背景上呈黃色。
③四氯鄰苯二甲酸酐 檢出物：芳香烴 溶液：2 %四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯（10:1） 的溶液。方法：噴后置紫外光下觀察。
④甲醛/ 硫酸 檢出物：多環(huán)芳烴 溶液：37% 甲醛溶液0.2ml 溶于濃硫酸 l0ml 。(2) 醇類3,5- 二硝基苯酰氯 檢出物：醇類 溶液：I .2% 本品甲苯溶液；II .0.5% 氫氧化鈉溶液；III .0.002% 羅丹明溶液。
方 法：先噴（I） ，在空氣中干燥過夜，用蒸氣薰2min ，將紙或薄層通過試液（II）30s ，噴水洗，趁濕通過（III）15s ，空氣干燥，紫外燈下觀察。硝酸鈰銨 檢出物：醇類 溶液：I .1% 硝酸鈰銨的0.2mol/L 硝酸溶液；II . N,N- 二甲基- 對苯二胺鹽酸鹽1.5g 溶于甲醇、水與乙酸（128ml+25ml+1.5ml） 混合液中，用前將（I） 與（II） 等量混合。
噴板后于105 o C 加熱5min 。
4.薄層色譜顯色規(guī)律是什么
薄層色譜的顯色要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，具體分為幾大類：1、待分析成分本身具有紫外吸收，在紫外光燈下有明顯特殊顏色的熒光。
如當(dāng)歸的鑒別，點樣后的薄層色譜板在展開后，取出，晾干，置于紫外光燈下（365nm）下檢視。2、待分析成分顏色不明顯，需要噴顯色劑才可以檢視出斑點，還可以置于紫外光燈下檢視。
如黃芪的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，10%的硫酸乙醇溶液噴霧后，在105攝氏度加熱約5min，供試品圖譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點；置紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同的橙色斑點。3、待分析成分的顏色很淺，可以噴顯色劑顯色后，再檢視。
如木香的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105攝氏度加熱5min，再檢視。4、待分析成分的顏色很深，展開后晾干，斑點的顏色較明顯，易直接檢視。
但這種情況較少。注：顯色中以上1和3情況應(yīng)用較多。
薄層板在展開后多需要噴顯色劑，顯色劑的選擇要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，比如生物堿類多用改良碘化鉍鉀做顯色劑，但麻黃堿而又用茚三酮為顯色劑，蒽醌類成分噴稀NaOH做顯色劑等等，在噴顯色劑時不宜噴得太多，噴得霧滴不要太大，否則斑點顯色不好而不易檢視，多總結(jié)即可在實驗操作應(yīng)用。另外，紫外光燈下檢視的波長有254nm和365nm，但一般365nm應(yīng)用較多。
