薄層色譜板都顯色方法(薄層色譜顯色規(guī)律是什么)
1.薄層色譜顯色規(guī)律是什么
薄層色譜的顯色要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，具體分為幾大類：
1、待分析成分本身具有紫外吸收，在紫外光燈下有明顯特殊顏色的熒光。如當(dāng)歸的鑒別，點(diǎn)樣后的薄層色譜板在展開后，取出，晾干，置于紫外光燈下（365nm）下檢視。
2、待分析成分顏色不明顯，需要噴顯色劑才可以檢視出斑點(diǎn)，還可以置于紫外光燈下檢視。如黃芪的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，10%的硫酸乙醇溶液噴霧后，在105攝氏度加熱約5min，供試品圖譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點(diǎn)；置紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同的橙色斑點(diǎn)。
3、待分析成分的顏色很淺，可以噴顯色劑顯色后，再檢視。如木香的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105攝氏度加熱5min，再檢視。
4、待分析成分的顏色很深，展開后晾干，斑點(diǎn)的顏色較明顯，易直接檢視。但這種情況較少。
注：顯色中以上1和3情況應(yīng)用較多。薄層板在展開后多需要噴顯色劑，顯色劑的選擇要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，比如生物堿類多用改良碘化鉍鉀做顯色劑，但麻黃堿而又用茚三酮為顯色劑，蒽醌類成分噴稀NaOH做顯色劑等等，在噴顯色劑時(shí)不宜噴得太多，噴得霧滴不要太大，否則斑點(diǎn)顯色不好而不易檢視，多總結(jié)即可在實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)用。另外，紫外光燈下檢視的波長有254nm和365nm，但一般365nm應(yīng)用較多。
2.薄層色譜的顯示定位方法有哪些
a 光學(xué)檢出法
a自然光（400~800nm）
b紫外光（254nm或365nm）
c熒光一些化合物吸收了較短波長的光，在瞬間發(fā)射出比照射光波長更長的光，而在紙或薄層上顯出不同顏色的熒光斑點(diǎn)（靈敏度高、專屬性高）
b 蒸汽顯色法
顯色
多數(shù)有機(jī)化合物吸附碘蒸氣后顯示不同程度的黃褐色斑點(diǎn)，這種反應(yīng)有可逆及不可逆兩種情況，前者在離開碘蒸氣后，黃褐色斑點(diǎn)逐漸消退，并且不會改變化合物的性質(zhì)，且靈敏度也很高，故是定位時(shí)常用的方法；后者是由于化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強(qiáng)了共軛體系，因此在紫外光下可以發(fā)出強(qiáng)烈而穩(wěn)定的熒光，對定性及定量都非常有利，但是制備薄層時(shí)要注意被分離的化合物是否改變了原來的性質(zhì)。
c 物理顯色法
用紫外照射分離后的紙或薄層后，使化合物產(chǎn)生光加成，光分解、光氧化還原及光異構(gòu)等光化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致物質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生某些變化，如形成熒光發(fā)射功能團(tuán)。發(fā)生熒光增強(qiáng)或淬滅及熒光物質(zhì)的激發(fā)或發(fā)射波長發(fā)生移動等現(xiàn)象，從而提高了分析的靈敏度和選擇性。
d 試劑顯色法
廣泛應(yīng)用的定位方法。用于紙色譜的顯色劑一般都適用于薄層色譜，還有防腐劑的顯色劑不適合用于紙色譜及含有有機(jī)黏合劑薄層的顯色，又時(shí)噴顯色劑后續(xù)加熱，這也不是用于紙色譜。
顯色方法a噴霧顯色：顯色劑溶液以氣溶膠的形式均勻的噴灑在紙和薄層。b 浸漬顯色：揮去展開劑的薄層板，垂直的插入盛有展開劑的浸漬槽中，設(shè)定浸板及抽出速度和規(guī)定在顯色劑中浸漬的時(shí)間。
顯色試劑
a 通用顯色劑硫酸溶液（硫酸：水 1:1，硫酸：乙醇1:1）、0.5%碘的氯仿溶液、中性0.05%高錳酸鉀溶液、堿性高錳酸鉀溶液（還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色斑點(diǎn)）
b 專屬顯色劑
3.常用的tlc顯色方法,顯色劑有哪些
TLC 顯色試劑的選擇 顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機(jī)化合物的通用顯色 劑；另一類是根據(jù)化合物分類或特殊官能團(tuán)設(shè)計(jì)的專屬性顯色劑。
通用顯色劑 硫酸 常用的有四種溶液：硫酸- 水（1:1） 溶液；硫酸- 甲醇或乙醇（1:1） 溶液；1.5mol/L 硫酸溶液與0.5-1.5mol/L 硫酸銨溶液，噴后110 ℃烤15min ，不同有機(jī) 化合物顯不同顏色。0.5 %碘的氯仿溶液 對很多化合物顯黃棕色。
中性0.05 %高錳酸鉀溶液 易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。堿性高錳酸鉀試劑 還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色。
溶液 I :1% 高錳酸鉀溶液；溶液 II :5% 碳酸鈉溶液；溶液 I 和溶液 II 等量混合應(yīng)用。酸性高錳酸鉀試劑 噴1.6% 高錳酸鉀濃硫酸溶液（ 溶解時(shí)注意防止爆炸） ，噴 后薄層于180 o C 加熱15 ~20min 。
酸性重鉻酸鉀試劑 噴5% 重鉻酸鉀濃硫酸溶液，必要時(shí)150 o C 烤薄層。5% 磷鉬酸乙醇溶液噴后120 o C 烘烤，還原性化合物顯藍(lán)色，再用氨氣薰，則背景變 為無色。
專屬性顯色劑 由于化合物種類繁多，因此專屬性顯色劑也是很多的，現(xiàn)將在各類化合物中 最常用的顯色劑列舉如下：（1） 烴類 ①硝酸銀/ 過氧化氫 檢出物：鹵代烴類 溶液：硝酸銀0.1g 溶于水1ml ，加2- 苯氧基乙醇 l00ml ，用丙酮稀釋至200ml ，再加30% 過氧化氫1 滴。方法：噴后置未過濾的紫外光下照射；結(jié)果：斑點(diǎn)呈暗黑色。
②熒光素/ 溴 檢出物：不飽和烴 溶液：I .熒光素0.1g 溶于乙醇100ml ;II .5% 溴的四氯化碳溶液。方法：先噴（I） ，然后置含溴蒸氣容器內(nèi)，熒光素轉(zhuǎn)變?yōu)樗匿鍩晒馑兀?曙紅） ，熒光 消失，不飽和烴斑點(diǎn)由于溴的加成，阻止生成曙紅而保留熒光，多數(shù)不飽和烴在 粉紅色背景上呈黃色。
③四氯鄰苯二甲酸酐 檢出物：芳香烴 溶液：2 %四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯（10:1） 的溶液。方法：噴后置紫外光下觀察。
④甲醛/ 硫酸 檢出物：多環(huán)芳烴 溶液：37% 甲醛溶液0.2ml 溶于濃硫酸 l0ml 。(2) 醇類3,5- 二硝基苯酰氯 檢出物：醇類 溶液：I .2% 本品甲苯溶液；II .0.5% 氫氧化鈉溶液；III .0.002% 羅丹明溶液。
方 法：先噴（I） ，在空氣中干燥過夜，用蒸氣薰2min ，將紙或薄層通過試液（II）30s ，噴水洗，趁濕通過（III）15s ，空氣干燥，紫外燈下觀察。硝酸鈰銨 檢出物：醇類 溶液：I .1% 硝酸鈰銨的0.2mol/L 硝酸溶液；II . N,N- 二甲基- 對苯二胺鹽酸鹽1.5g 溶于甲醇、水與乙酸（128ml+25ml+1.5ml） 混合液中，用前將（I） 與（II） 等量混合。
噴板后于105 o C 加熱5min 。
4.薄層色譜顯色規(guī)律是什么
薄層色譜的顯色要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，具體分為幾大類：1、待分析成分本身具有紫外吸收，在紫外光燈下有明顯特殊顏色的熒光。
如當(dāng)歸的鑒別，點(diǎn)樣后的薄層色譜板在展開后，取出，晾干，置于紫外光燈下（365nm）下檢視。2、待分析成分顏色不明顯，需要噴顯色劑才可以檢視出斑點(diǎn)，還可以置于紫外光燈下檢視。
如黃芪的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，10%的硫酸乙醇溶液噴霧后，在105攝氏度加熱約5min，供試品圖譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的棕褐色斑點(diǎn)；置紫外光燈（365nm）下檢視，顯相同的橙色斑點(diǎn)。3、待分析成分的顏色很淺，可以噴顯色劑顯色后，再檢視。
如木香的鑒別，薄層色譜板在展開后，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105攝氏度加熱5min，再檢視。4、待分析成分的顏色很深，展開后晾干，斑點(diǎn)的顏色較明顯，易直接檢視。
但這種情況較少。注：顯色中以上1和3情況應(yīng)用較多。
薄層板在展開后多需要噴顯色劑，顯色劑的選擇要根據(jù)待分析成分的性質(zhì)來定，比如生物堿類多用改良碘化鉍鉀做顯色劑，但麻黃堿而又用茚三酮為顯色劑，蒽醌類成分噴稀NaOH做顯色劑等等，在噴顯色劑時(shí)不宜噴得太多，噴得霧滴不要太大，否則斑點(diǎn)顯色不好而不易檢視，多總結(jié)即可在實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)用。另外，紫外光燈下檢視的波長有254nm和365nm，但一般365nm應(yīng)用較多。
