薄層(薄層色譜基本操作有哪幾個關(guān)鍵技術(shù)各項操作應(yīng)該注意什么)
1.薄層色譜基本操作有哪幾個關(guān)鍵技術(shù) 各項操作應(yīng)該注意什么
薄層色譜（Thin Layer Chromatography）常用TLC表示，又稱薄層層析，屬于固-液吸附色譜。是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。一方面適用于小量樣品（幾到幾十微克，甚至0.01μg）的分離；另一方面若在制作薄層板時，把吸附層加厚，將樣品點成一條線，則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外，在進行化學(xué)反應(yīng)時，常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板（10*3cm左右）上均勻的涂一層吸附劑或支持劑，帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。
注意事項：
1鋪制薄層板：鋪板用的勻漿不宜過稠或過?。哼^稠，板容易出現(xiàn)拖動或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發(fā)后，板表面較粗糙。勻漿配比一般是硅膠G：水=1:2~3，硅膠G：羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間，根據(jù)經(jīng)驗來定，與空氣濕度有關(guān)，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板涂層的厚度，進一步影響上樣量。涂層薄，點樣易過載；涂層厚，顯色不那么明顯。通常，板的質(zhì)量對薄層鑒別的影響不是很大，影響最大的是展開劑的配制和展開系統(tǒng)的飽和。 2點樣：盡量用小的點樣管。如果有足夠的耐性，最好只用1微升的點樣管。這樣，點的斑點較小，展開的色譜圖分離度好，顏色分明。樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大，點樣斑點擴散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。點好樣的薄層板用電吹風(fēng)的熱風(fēng)吹干或放入干燥器里晾干。 薄層色譜用于定量時，點樣是最主要的誤差來源。 供試液的溶劑均有不同程度的洗脫力，所以在點樣的同時，樣品在原點就可是成環(huán)形展開，原點直徑的擴散促進了這種展開，Kaiser稱之為“上樣環(huán)形色譜效應(yīng)”。如果樣品在溶劑中的溶解度很大，原點將變成空心環(huán)。這種效應(yīng)對隨后的先行展開造成很不利的影響。 供試液的溶劑在原點的殘留，也會改變展開的選擇性，特別是供試液的溶劑與展開劑的極性相差較大時更明顯。再者，親水性溶劑殘留在原點吸收大氣中的水分（特別在高濕度環(huán)境）對色譜的影響也不可低估。因此點樣時的同步干燥或繼后干燥以除去原點殘存的溶劑是需要的。但應(yīng)盡可能避免高溫加熱，如用吹風(fēng)筒加熱，樣品變?yōu)楣虘B(tài)后，部分或全部強烈的吸附在吸附劑的顆粒上，而促進了硅膠的有催化作用的活性表面故態(tài)化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致樣品的變性（尤其熱不穩(wěn)定物質(zhì)），至少移動相在展開時對這部分樣品的溶解速度比移動速度慢得多而形成拖尾（斑點拖尾的原因之一）。
3 展開劑配制 選擇合適的量器把各組成溶劑移入分液漏斗，強烈振搖使混合液充分混勻，放置，如果分層，取用體積大的一層作為展開劑。絕對不應(yīng)該把各組成溶液倒入展開缸，振搖展開缸來配制展開劑。混合不均勻和沒有分液的展開劑，會造成層析的完全失敗。各組成溶劑的比例準(zhǔn)確度對不同的分析任務(wù)有不同的要求，盡量達到實驗室儀器的最高精確度，比如：取1ml的溶劑，應(yīng)使用1ml的單標(biāo)移液管，移液管應(yīng)符合計量認(rèn)證要求，盡管多數(shù)時候這不是必須的。 4 展開系統(tǒng)的飽和 一般使用的是雙槽的展開缸，一槽用來放展開劑，另一槽可加入氨水或硫酸。把待展開的板放入兩槽間的平臺，斜架著，蓋上展開缸的蓋子。讓展開劑的蒸氣充滿展開缸，并使薄層板吸附蒸氣達到飽和，防止邊沿效應(yīng)，飽和時間在半個小時左右。展開時難免要打開蓋子把薄層板放入展開劑中，不過對薄層板與蒸氣的吸附平衡影響不大，當(dāng)然動作應(yīng)該盡量輕、快。 5 溫濕度的控制 溫濕度對薄層影響都很大。不凍結(jié)的前提下，通常溫度越低分離越好，較難的分離需在低溫下分離，例如人參皂苷。濕度的影響，估計主要是影響薄層板的吸附能力，導(dǎo)致選擇性（容量因子）的變化，濕度應(yīng)根據(jù)實際情況確定。溫度控制使用空調(diào)器或冰柜，濕度控制是通過在另一展開槽放置相應(yīng)濃度的硫酸。 6 TLC通用顯色方法 通用顯色方法主要有： 1、紫外照射法：方便、不破壞樣品； 2、碘蒸氣法：通用性強，與紫外法結(jié)合靈敏度高于該兩法單獨使用； 3、熒光試劑：制造熒光背景，使原來紫外下無熒光物質(zhì)被鑒別，有熒光物質(zhì)更明顯； 4、硫酸溶劑：對絕大多數(shù)有機物有效，但有破壞性。
2.薄層色譜法的基本原理
薄層色譜法是一種吸附薄層色譜分離法，它利用各成分對同一吸附劑吸附能力不同，使在流動相（溶劑）流過固定相（吸附劑）的過程中，連續(xù)的產(chǎn)生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，從而達到各成分的互相分離的目的。
薄層層析可根據(jù)作為固定相的支持物不同，分為薄層吸附層析（吸附劑）、薄層分配層析（纖維素）、薄層離子交換層析（離子交換劑）、薄層凝膠層析（分子篩凝膠）等。一般實驗中應(yīng)用較多的是以吸附劑為固定相的薄層吸附層析。
吸附是表面的一個重要性質(zhì)。任何兩個相都可以形成表面，吸附就是其中一個相的物質(zhì)或溶解于其中的溶質(zhì)在此表面上的密集現(xiàn)象。在固體與氣體之間、固體與液體之間、吸附液體與氣體之間的表面上，都可能發(fā)生吸附現(xiàn)象。
物質(zhì)分子之所以能在固體表面停留，這是因為固體表面的分子（離子或原子）和固體內(nèi)部分子所受的吸引力不相等。在固體內(nèi)部，分子之間相互作用的力是對稱的，其力場互相抵消。而處于固體表面的分子所受的力是不對稱的，向內(nèi)的一面受到固體內(nèi)部分子的作用力大，而表面層所受的作用力小，因而氣體或溶質(zhì)分子在運動中遇到固體表面時受到這種剩余力的影響，就會被吸引而停留下來。吸附過程是可逆的，被吸附物在一定條件下可以解吸出來。在單位時間內(nèi)被吸附于吸附劑的某一表面積上的分子和同一單位時間內(nèi)離開此表面的分子之間可以建立動態(tài)平衡，稱為吸附平衡。吸附層析過程就是不斷地產(chǎn)生平衡與不平衡、吸附與解吸的動態(tài)平衡過程。
例如用硅膠和氧化鋁作支持劑，其主要原理是吸附力與分配系數(shù)的不同，使混合物得以分離。當(dāng)溶劑沿著吸附劑移動時，帶著樣品中的各組分一起移動，同時發(fā)生連續(xù)吸附與解吸作用以及反復(fù)分配作用。由于各組分在溶劑中的溶解度不同，以及吸附劑對它們的吸附能力的差異，最終將混合物分離成一系列斑點。如作為標(biāo)準(zhǔn)的化合物在層析薄板上一起展開，則可以根據(jù)這些已知化合物的Rf值（后面介紹Rf值）對各斑點的組分進行鑒定，同時也可以進一步采用某些方法加以定量。
3.薄層層析法具體操作注意事項是什么
鋪板用的勻漿不宜過稠或過?。哼^稠，板容易出現(xiàn)拖動或停頓造成的層紋；過稀，水蒸發(fā)后，板表面較粗糙。
勻漿配比一般是硅膠G：水=1:2~3，硅膠G：羧甲基纖維素鈉水溶液=1:2。研磨勻漿的時間，根據(jù)經(jīng)驗來定，與空氣濕度有關(guān)，一般通過拿起研棒時勻漿下滴的情況來判斷，越稠越難下滴。
勻漿的稀稠除影響板的平滑外，也影響板涂層的厚度，進一步影響上樣量。涂層薄，點樣易過載；涂層厚，顯色不那么明顯。
通常，板的質(zhì)量對薄層鑒別的影響不是很大，影響最大的是展開劑的配制和展開系統(tǒng)的飽和。 點樣 盡量用小的點樣管。
如果有足夠的耐性，最好只用1微升的點樣管。 這樣，點的斑點較小，展開的色譜圖分離度好，顏色分明。
樣品溶液的含水量越小越好，樣品溶液含水量大，點樣斑點擴散大。樣品溶液的溶劑一般是無水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。
點好樣的薄層板用電吹風(fēng)的熱風(fēng)吹干或放入干燥器里晾干。 展開劑配制 選擇合適的量器把各組成溶劑移入分液漏斗，強烈振搖使混合液充分混勻，放置，如果分層，取用體積大的一層作為展開劑。
絕對不應(yīng)該把各組成溶液倒入展開缸，振搖展開缸來配制展開劑?；旌喜痪鶆蚝蜎]有分液的展開劑，會造成層析的完全失敗。
各組成溶劑的比例準(zhǔn)確度對不同的分析任務(wù)有不同的要求，盡量達到實驗室儀器的最高精確度，比如：取1ml的溶劑，應(yīng)使用1ml的單標(biāo)移液管，移液管應(yīng)符合計量認(rèn)證要求，盡管多數(shù)時候這不是必須的。 展開系統(tǒng)的飽和 一般使用的是雙槽的展開缸，一槽用來放展開劑，另一槽可加入氨水或硫酸。
把待展開的板放入兩槽間的平臺，斜架著，蓋上展開缸的蓋子。讓展開劑的蒸氣充滿展開缸，并使薄層板吸附蒸氣達到飽和，防止邊沿效應(yīng)，飽和時間在半個小時左右。
展開時難免要打開蓋子把薄層板放入展開劑中，不過對薄層板與蒸氣的吸附平衡影響不大，當(dāng)然動作應(yīng)該盡量輕、快。 溫濕度的控制 溫濕度對薄層影響都很大。
不凍結(jié)的前提下，通常溫度越低分離越好，較難的分離需在低溫下分離，例如人參皂苷。濕度的影響，估計主要是影響薄層板的吸附能力，導(dǎo)致選擇性（容量因子）的變化，濕度應(yīng)根據(jù)實際情況確定。
溫度控制使用空調(diào)器或冰柜，濕度控制是通過在另一展開槽放置相應(yīng)濃度的硫酸。 顯色 噴顯色劑顯色最重要是有好的霧化器。
4.薄層層析法的原理是什么
薄層層析（TLC） 1 【含義】薄層層析是將吸附劑或者支持劑（有時加入固化劑）均勻地鋪在一塊玻璃上，形成薄層。
把欲分離的樣品點在薄層上，然后用適宜的溶劑展開，使混合物得以分離的方法。由于層析在薄層上進行故而得名。
2 【應(yīng)用】薄層層析是一種微量、快速的層析方法。 它不僅可以用于純物質(zhì)的鑒定，也可用于混合物的分離、提純及含量的測定。
還可以通過薄層層析來摸索和確定柱層析時的洗脫條件。 3 【分類】根據(jù)分離的原理不同，薄層層析可以分為兩類：用吸附劑鋪成的薄層所進行的層析為吸附薄層層析；用纖維素粉、硅膠、硅藻土為支持劑鋪成的薄層，屬于分配薄層層析。
薄層層析中以吸附薄層為多用，吸附薄層中常用的吸附劑為氧化鋁和硅膠。 4 【原理1】吸附薄層主要是利用吸附劑對樣品中各成分吸附能力不同，及展開劑對它們的解吸附能力的不同，使各成分達到分離。
吸附作用主要由于物體表面作用力、氫鍵、絡(luò)合、靜電引力、范德華力等產(chǎn)生。 吸附強度決定于吸附劑的吸附能力，還受被吸附成分的性質(zhì)影響，更與展開劑的性質(zhì)有關(guān)。
5【原理2】分配薄層層析的原理是，用極性溶劑吸苷在固體支持劑上所形成的混合物，鋪成薄層（或裝柱），然后活化、點樣（或上樣），再用極性較弱的展開劑（或洗脫劑）進行展開。 在展開過程中，各成分在固定相和流動相之間作連續(xù)不斷的分配。
由于各成分在兩相間的分配系數(shù)不同，因而可以達到相互分離的目的。 6【圖例】層析硅膠 。
5.什么是薄層色譜法
薄層色譜法，系將供試品溶液點樣于薄層板上，經(jīng)展開、檢視后所得的色譜圖，與適宜的對照物按同法所得的色譜對比，用于藥品的鑒別或雜質(zhì)檢查的方法。
1。儀器與材料 （1）薄層板 自制薄層板玻板要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。
最常用的固定相有硅膠G、硅膠GF254、硅膠H和硅膠HF254，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F254等。 其顆粒大小，一般要求直徑為5~40μm。
薄層涂布，一般可分為無黏合劑和含黏合劑兩種；前者系將固定相直接涂布于玻板上，后者系在固定相中加入一定量的黏合劑，一般常用10%~15%煅石膏（CaSO4·2H2O在140℃加熱4小時），混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液（0。 2%~0。
5%）適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻板上。使用涂布器涂布應(yīng)能使固定相在玻板上涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。
市售薄層板分普通薄層板和高效薄層板，如硅膠薄層板、硅膠GF254薄層板、聚酰胺薄膜和鋁基片薄層板等。 （2）點樣器同紙色譜法項下。
（3）展開容器應(yīng)使用適合薄層板大小的玻璃制薄層色譜展開缸，并有嚴(yán)密的蓋子，底部應(yīng)平整光滑，或有雙槽。 （4）顯色劑見各品種項下規(guī)定。
可采用噴霧顯色、浸漬顯色或置碘蒸氣中顯色，檢出斑點。 （5）顯色裝置噴霧顯色要求用壓縮氣體使顯色劑呈均勻細霧狀噴出；浸漬顯色可用專用玻璃器械或用適宜的玻璃缸代用；蒸氣熏蒸顯色可用雙槽玻璃缸或適宜大小的干燥器代替。
（6）檢視裝置為裝有可見光、短波紫外光（254nm）、長波紫外光（365nm）光源及相應(yīng)濾片的暗箱，可附加攝像設(shè)備供拍攝圖像用，暗箱內(nèi)光源應(yīng)有足夠的光照度。 2。
操作方法 （1）薄層板制備 自制薄層板除另有規(guī)定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為0。 2~0。
3mm），取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干后，在110℃活化30分鐘，即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度（可通過透射光和反射光檢視）。
市售薄層板臨用前一般應(yīng)在110℃活化30分鐘。聚酰胺薄膜不需活化。
鋁基片薄層板可根據(jù)需要剪裁，但須注意剪裁后的薄層板底邊的硅膠層不得有破損。 如在貯放期間被空氣中雜質(zhì)污染，使用前可用適宜的溶劑在展開容器中上行展開預(yù)洗，110℃活化后，放干燥器中備用。
（2）點樣除另有規(guī)定外，用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊2。0cm，樣點直徑為2~4mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜，一般為1。
0~2。0cm。
點樣時必須注意勿損傷薄層板表面。 （3）展開展開缸如需預(yù)先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，并在壁上貼兩條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封頂蓋，使系統(tǒng)平衡或按各品種正文規(guī)定操作。
[醫(yī)學(xué)教育 網(wǎng)搜集整理 ] 將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0。 5~1。
0cm（切勿將樣點浸入展開劑中），密封頂蓋，待展開至規(guī)定距離（一般為10~15cm），取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測。 展開可以向一個方向進行，即單向展開；也可以進行雙向展開，即先向一個方向展開，取出，待展開劑完全揮發(fā)后，將薄層板轉(zhuǎn)動90°，再用原展開劑或另一種展開劑進行展開；亦可多次展開。
（4）顯色與檢視熒光薄層板可用熒光猝滅法；普通薄層板，如有色物質(zhì)可直接檢視；無色物質(zhì)可用物理或化學(xué)方法檢視。物理方法是檢出斑點的熒光顏色及強度；化學(xué)方法一般用化學(xué)試劑顯色后，立即覆蓋同樣大小的玻板，檢視。
3。系統(tǒng)適用性試驗來源： 按各品種項下要求對檢測方法進行系統(tǒng)適用性試驗，檢測斑點的檢測靈敏度、比移值（Rf）和分離效能應(yīng)符合規(guī)定。
（1）檢測靈敏度系指雜質(zhì)檢查時，采用對照溶液稀釋若干倍的溶液與供試品溶液和對照溶液在規(guī)定的色譜條件下，在同一塊薄層板上點樣、展開、檢視，前者應(yīng)顯示清晰的斑點。 （2）比移值（Rf）系指從基線至展開斑點中心的距離與從基線至展開劑前沿的距離的比率。
可用計算供試品溶液主斑點與對照品溶液主斑點的比移值進行比較，或用比移值來說明主斑點或雜質(zhì)斑點的位置。 （3）分離效能鑒別時，對照品與結(jié)構(gòu)相似的藥物對照品制成的混合對照溶液應(yīng)顯示兩個清晰分離的斑點。
雜質(zhì)檢查時，雜質(zhì)對照品用供試品自身稀釋對照溶液或同品種對照品溶液溶解制成的混合對照溶液應(yīng)顯示兩個清晰分離的斑點，或待測成分與相鄰的雜質(zhì)斑點應(yīng)清晰分離。 4.測定法來源：考試大 （1）鑒別可采用與同濃度的對照品溶液，在同一塊薄層板上點樣、展開與檢視，供試品溶液所顯主斑點的顏色（或熒光）與位置（Rf）應(yīng)與對照品溶液的主斑點一致，而且主斑點的大小與顏色的深淺也應(yīng)大致相同。
或采用供試品溶液與對照品溶液等體積混合，醫(yī)學(xué) 教育 網(wǎng)搜集整理 應(yīng)顯示單一、緊密的斑點；或選用與供試品化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的藥物對照品與供試品溶液的主斑點比較，兩者Rf應(yīng)不同；或?qū)⑸鲜鰞煞N溶液等體積混合，應(yīng)顯示兩個清晰分離的斑點。 （2）雜質(zhì)檢查可采用雜質(zhì)對照品法、供試。
6.薄層色譜法是什么
薄層色譜法，系將適宜的吸附劑或載體涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。
待點樣、展開后，與適宜的對照物按同法在同板上所得的色譜圖對比，并可用薄層掃描儀進行掃描，用以進行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測定的方法。 1。
儀器與材料 （1） 玻板 除另有規(guī)定外，用10cm*10cm,10cm*15cm,20cm*10cm或20cm*20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。 （2） 吸附劑或載體 最常用的有硅膠G、硅膠GF、硅膠H、硅膠HF，其次有硅藻土、硅藻土G、氧化鋁、氧化鋁G、微晶纖維素、微晶纖維素F等。
其顆粒大小一般要求直徑為10~40μm。薄層涂布，除另有規(guī)定外，一般可分無粘合劑和含粘合劑兩種；前者系將吸附劑或載體直接涂布于玻璃板上，后者系在吸附劑或載體中加入一定量的粘合劑，一般常用10%~15%煅石膏（CaSO4·2H2O在 140℃烘4小時），混勻后加水適量使用，或用羧甲基纖維素鈉水溶液（0。
2%~0。5%）適量調(diào)成糊狀，均勻涂布于玻璃板上。
也有含一定改性劑如熒光劑或緩沖液等的薄層。 （3） 涂布器 應(yīng)能使吸附劑或載體在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。
（4） 點樣器 一般采用微升毛細管或與之相應(yīng)的點樣器材。 （5）展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或有雙槽，蓋子須密閉。
2。操作方法 （1） 薄層板制備 除另有規(guī)定外，將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為 0。
25~0。5mm），取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于 110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用。
或用商品預(yù)制板。 （2） 點樣 除另有規(guī)定外，用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1。
0~1。5cm，樣點直徑一般不大于3mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。
點樣時必須注意勿損傷薄層表面。 （3） 展開 將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距原點5mm為宜，密封，待展開至規(guī)定距離，除另有規(guī)定外，一般為8~15cm，取出薄層板，晾干，按正文項下的規(guī)定檢測。
展開缸如需預(yù)先用展開劑預(yù)平衡，可在缸中加入適量的展開劑，必要時并在壁上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，蓋嚴(yán)，使展開缸平衡或按正文規(guī)定操作。 （4） 如需用薄層掃描儀對色譜進行掃描供鑒別、檢查或定量，則可用薄層掃描法。
3。 薄層掃描法 系指用一定波長的光照射在薄層板上，對薄層色譜有吸收紫外光或可見光的斑點，或經(jīng)激發(fā)后能發(fā)射出熒光的斑點進行掃描，將掃描得到的圖譜及積分?jǐn)?shù)據(jù)用于藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測定。
除另有規(guī)定外，薄層掃描方法可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，結(jié)合具體情況，選擇反射方式，采用吸收法，或熒光法，用雙波長或單波長掃描。 測定方法有內(nèi)標(biāo)法及外標(biāo)法，由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故薄層掃描定量測定應(yīng)在保證供試品斑點的量在校正曲線的線性范圍內(nèi)的情況下，與對照品同板點樣，展開，掃描，測量和計算。
用外標(biāo)法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。 含量測定時，供試品溶液和對照品溶液應(yīng)交叉點于同一薄層板上，供試品點樣不得少于4個，對照品每一濃度不得少于2個，薄層掃描定量用的對照品純度應(yīng)符合含量測定用對照品的要求。
7.薄層色譜的原理是什么
物質(zhì)分子之所以能在固體表面停留，這是因為固體表面的分子（離子或原子）和固體內(nèi)部分子所受的吸引力不相等。
在固體內(nèi)部，分子之間相互作用的力是對稱的，其力場互相抵消。而處于固體表面的分子所受的力是不對稱的，向內(nèi)的一面受到固體內(nèi)部分子的作用力大，而表面層所受的作用力小，因而氣體或溶質(zhì)分子在運動中遇到固體表面時受到這種剩余力的影響，就會被吸引而停留下來。
吸附過程是可逆的，被吸附物在一定條件下可以解吸出來。在單位時間內(nèi)被吸附于吸附劑的某一表面積上的分子和同一單位時間內(nèi)離開此表面的分子之間可以建立動態(tài)平衡，稱為吸附平衡。
吸附層析過程就是不斷地產(chǎn)生平衡與不平衡、吸附與解吸的動態(tài)平衡過程。
